Comparação de diferentes detergentes utilizando a técnica de salting out para extração de DNA humano a partir de amostras sanguíneas
Author(s) -
Andressa Dametto,
Claudete Rempel,
Júlia Pasqualini Genro
Publication year - 2013
Publication title -
conscientiae saúde
Language(s) - Portuguese
Resource type - Journals
eISSN - 1983-9324
pISSN - 1677-1028
DOI - 10.5585/conssaude.v12n1.3894
Subject(s) - microbiology and biotechnology , chemistry , dna , biology , biochemistry
Introdução: A extração de DNA genômico em humanos é o primeiro passo para estudos de genética molecular. Objetivo: Avaliar o sucesso da extração de DNA genômico baseado na técnica de salting out a partir de amostras sanguíneas, comparando diferentes reagentes de lise de membranas. Métodos: Foram testados três reagentes caseiros e o reagente Nonidet P-40, em diferentes concentrações. Avaliaram-se a concentração do DNA obtido e a pureza das amostras por meio da espectrofotometria e a aplicabilidade na técnica de PCR. Resultados: Houve grande quantidade de DNA extraído utilizando Nonidet P-40 e sabão em pó. Quanto à qualidade do DNA, o Nonidet P-40 resultou em um DNA com maior pureza. Na PCR, apenas o DNA extraído com Nonidet P-40 apresentou amplificação satisfatória. Conclusão: O Nonidet P-40 parece ser o reagente mais indicado para uso em técnicas moleculares e o sabão em pó pode ser adequado para práticas em aulas de biologia molecular.
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