عزل وتنقية أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز من مصل دم مرضى الهيموفيليا ودراسة تأثير بعض المركبات الايضية الثانوية لنبات الكسوب على فعاليته

تضمنت الدراسة عزل وتنقية أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز (GPx) في مصل دم مرضى الهيموفيليا، إذ شملت 48 عينة من مصل دم مرضى الهيموفيليا بكلا نوعيه (40 عينة من النوع A و 8 من النوع B)، علاوة على 50 عينة من الأشخاص الأصحاء ومن الذكور فقط. بينت نتائج الدراسة وجود انخفاض معنوي عند مستوى الاحتمالية P≤ 0.05 لفعالية أنزيم GPx في مصل دم مرضى الهيموفيليا بكلا نوعيه. وتم ايضا عزل وتنقية أنزيم GPx من مصل دم المصابين بالهيموفيليا من خلال الترسيب بكبريتات الامونيوم والديلزة وباستخدام تقنية كروماتوغرافيا التبادل الايوني DEAD – Cellulose حيث تم فصل حزمة بروتينية رئيسة والتي اعتمد عليها في تحديد الظروف المثلى للأنزيم المنقى جزئيا. حُددت الظروف المثلى للأنزيم المنقى جزئيا من مصل الدم وكانت أعلى فعالية لزمن التفاعل عند الدقيقة 6، دالة حامضية عند pH=8، وتركيز الانزيم 105 µg/ml، وتركيز مادة الاســــاس H2O2 L/0.6 mmol، ودرجة حرارة 40oC وان السرعة القصوى Vmax وثابت ميكيلس Km كانت µmol/min 0.9 و 0.195 mmol/Liter على التوالي باستخدام رسم لاينويفر. - برك. تضمنت الدراسة أيضا تأثير بعض النواتج الطبيعية من بذور نبات الكسوب (الزيت، الفلافونويدات، الكلايكوسيدات) على فعالية أنزيم GPx.حُددت الظروف المثلى للأنزيم المنقى جزئيا من مصل الدم وكانت أعلى فعالية عن عند الدقيقة (6)، دالة حامضية عند ( pH=8)،و تركيز الانزيم ((105 µg/ml، وتركيز مادة الاساس H2O2 (L/0.6 mmol)،و درجة حرارة(40oC) وان السرعة القصوى (Vmax) وثابت ميكيلس (Km) كانت مساوية (mol/minµ 0.9) و(0.195mmol\Liter) على التوالي باستخدام رسم لاين ويفر- برك. كما تضنت الدراسة عزل بعض النواتج الطبيعية من بذور نبات الكسوب (الزيت ، القلافونويدات ، الكلايكوسيدات) وبينت النتائج انها تزيد من فعالية الانزيم المنقى جزئيا من مصل الدم .