Purificação, caracterização físico-química e atividade anticoagulante de glicosaminoglicanos isolados da pele de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)

Os glicosaminoglicanos (GAGs) constituem a matriz extracelular de tecidos animais e os resíduos do processamento de peixes comercialmente cultivados podem oferecer novos agentes anticoagulantes em substituição à heparina (HEP) nas ciências médicas. Objetivou-se purificar, caracterizar físico-quimicamente e avaliar a atividade anticoagulante dos GAGs isolados da pele da tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus. Os GAGs foram extraídos com papaína em tampão acetato de sódio 100 mM (pH 5,0) contendo cisteína e EDTA (5 mM), seguido por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-celulose, utilizando um gradiente de NaCl. As frações obtidas foram liofilizadas e submetidas à eletroforese em gel de agarose a 0,5%. A atividade anticoagulante foi avaliada por meio do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA), usando-se plasma humano normal e HEP padrão (193 UI mg^-1). O perfil cromatográfico mostrou a separação de duas diferentes frações de GAGs (F I e F II), eluídas com 0,50 e 0,75 M de NaCl, respectivamente, revelando, por eletroforese, frações distintas em densidade de cargas, porém ambas mostrando GAGs com mobilidades semelhantes ao dermatam sulfato (DS) padrão, sugerindo-se a identificação preliminar desse GAG. Os GAGs modificaram o TTPA, cujas atividades perfizeram, respectivamente, 4,72 (F I) e 23,80 (F II) UI mg^-1, e expressaram-se dose-dependente. Portanto, o DS anticoagulante da pele de O. niloticus sugere uma fonte interessante para estudos posteriores de atividade antitrombótica