Open AccessHuman lactoferrin enhances the expression of transcription factor c-Fos in neuronal cultures under stimulated conditions
Author(s) -
М.Ю. Копаева,
А. М. Азиева,
Anton Cherepov,
Mikhail Nesterenko,
I Iu Zaraĭskaia
Publication year - 2021
Publication title -
patogenez
Language(s) - English
Resource type - Journals
ISSN - 2310-0435
DOI - 10.25557/2310-0435.2021.01.74-78
Subject(s) - c fos , colocalization , stimulation , in vitro , microbiology and biotechnology , transcription factor , lactoferrin , cytoplasm , immediate early gene , transcription (linguistics) , biology , cell culture , gene expression , chemistry , gene , biochemistry , endocrinology , genetics , linguistics , philosophy
Целью настоящей работы стало исследование влияния лактоферрина (Лф) человека на экспрессию транскрипционного фактора c-Fos в первичных нейрональных культурах после физиологической стимуляции, определение клеточной локализации Лф человека и возможной колокализации экзогенного белка с индуцированной экспрессией c-Fos. Методы. Первичные диссоциированные клеточные культуры получали из гиппокампа головного мозга новорожденных мышей (Р0-Р1) линии С57Вl/6. Индукцию экспрессии белка c-Fos в клетках осуществляли путем трехкратного добавления 50 мМ KСl в культуральную среду на 8-й день культивирования in vitro. Анализ содержания c-Fos проводили иммунофлюоресцентным методом через 2 часа после стимуляции. Результаты. Лф детектировался как в цитоплазме, так и в ядрах отдельных клеток культуры после стимуляции KСl. В ядрах некоторых клеток была выявлена колокализация включения Лф и экспрессии c-Fos. Было обнаружено, что предварительное введение Лф в культуральную среду увеличивало количество клеток, экспрессирующих c-Fos после добавления 50 мМ KСl. The aims of this research were 1) to study the effect of human lactoferrin (Lf) on the expression of the c-Fos transcription factor in primary neuronal cultures after physiological stimulation; 2) to determine the cellular localization of human Lf and possible colocalization of an exogenous protein with induced c-Fos expression. Methods. Primary dissociated cell cultures were obtained from the hippocampus of newborn C57Bl/6 mice (P0-P1). The expression of c-Fos was induced by addition of 50 mM KCl to the culture medium at 8 day in vitro. c-Fos content was analyzed by immunofluorescence 2 hrs after stimulation. Results. Lf was detected in cytoplasm and in nuclei after stimulation KCl. Lf inclusion and c-Fos expression were colocalized in the nuclei of some cells. Thus, results showed that pretreatment with Lf led to increase in the number of cells expressing c-Fos after exposure to 50 mM KCl.