Open AccessOptimización del ensayo de inhibición de la nicotinamida/ nicotinato mononucleótido adenililtransferasa de Leishmania braziliensis
Author(s) -
Luis Ernesto Contreras-Rodríguez,
María Helena Ramírez Hernández,
Carmen Giovana Granados Ramírez
Publication year - 2021
Publication title -
revista de la academia colombiana de ciencias exactas, físicas y naturales/revista de la academia colombiana de ciencias exactas, físicas y naturales
Language(s) - Spanish
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.124
H-Index - 2
eISSN - 2382-4980
pISSN - 0370-3908
DOI - 10.18257/raccefyn.1272
Subject(s) - humanities , microbiology and biotechnology , chemistry , biology , art
La nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenililtransferasa (NMNAT, EC 2.7.7.1/18) desempeñauna función central en la síntesis del dinucleótido de adenina y nicotinamida (NAD) debido a queen esta enzima confluyen las rutas de síntesis de novo y de reciclaje. El NAD es una moléculatrascendental en el metabolismo de todos los seres vivos, principalmente en el metabolismo redox. Eneste estudio se presenta una nueva estrategia metodológica para la evaluación de posibles inhibidoresde la NMNAT de Leishmania braziliensis (LbNMNAT). El método suprime la actividad inhibitoriacruzada con la enzima acoplada al ensayo de detección, la alcohol dehidrogenasa (ADH, EC 1.1.1.1).Experimentalmente se introdujo un paso intermedio de extracción en fase sólida de los inhibidoresantes de la ejecución del sistema enzimático de detección. La implementación del paso de extracciónposibilitó la evaluación específica de la enzima de interés, la LbNMNAT, sin afectar la enzimaacoplada ADH. El nuevo método permitió estudiar el efecto inhibitorio de la galotanina, productonatural de especies del género Rhus (Rhus chinensis), en la actividad de la LbNMNAT.