Open AccessDevelopment of DNA probe for detection of Aujeszky's disease virus
Author(s) -
Alexandre Luna Cândido,
Patrícia Pimental de Barros,
M. Resende,
R.B. Flaschart
Publication year - 1999
Publication title -
arquivo brasileiro de medicina veterinária e zootecnia/arquivo brasileiro de medicina veterinária e zootecnia
Language(s) - Portuguese
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.213
H-Index - 33
eISSN - 1678-4162
pISSN - 0102-0935
DOI - 10.1590/s0102-09351999000400001
Subject(s) - nick translation , polymerase chain reaction , genomic dna , virology , virus , dna , microbiology and biotechnology , nucleic acid , biology , hybridization probe , dot blot , southern blot , gene , genetics
A DNA hybridization dot-blot assay using a radioactive and a non-radioactive probe has been developed for the detection of Aujeszky's disease virus (ADV). The Bam H I 7 fragment of ADV genomic DNA was labeled by nick translation using 32P-dCTP and the 196bp polymerase chain reaction (PCR) gG glycoprotein gene amplified fragment was also labeled by nick translation but using biotin d-7-dATP. This technique provides a fast and effective means of detecting acute cases of ADV infection but it was unable to detect ADV nucleic acid sequences in trigeminal nerve ganglia of latent infected pigs and mice. Uma sonda radioativa e uma outra biotinilada foram produzidas para detecção do vírus da doença de Aujeszky (VDA). O fragmento de Bam H I 7 do DNA genômico do VDA foi marcado por "nick translation" empregando P32dCTP e um fragmento de 196pb, resultante de uma amplificação pela reação em cadeia pela polimerase marcado com biotina 7-dATP. Essas sondas, de uma maneira rápida e específica, prestaram-se para a detecção da infecção aguda pelo VDA. Entretanto, não se mostraram sensíveis o suficiente para detectar seqüências genômicas de VDA no gânglio trigêmio de suínos e camundongos com infecção latente