Ανάπτυξη μεθόδων φαρμακευτικής ανάλυσης με την τεχνική υγροχρωματογραφίας - φασματομετρίας μαζών και με σχηματισμό παραγώγων

Στο πρώτο μέρος της διατριβής πραγματοποιήθηκε σύγκριση δύο αντιδραστηρίων παραγωγοποίησης δανσυλοχλωρίδιο (dansyl chloride) και ισοθειοκυανικό φαινύλιο (phenyl isothiocyanate) στο LC-ESI-MS για τον προσδιορισμό της γλυκοζαμίνης. Ως μέτρο σύγκρισης τέθηκε το LOQ της μεθόδου και η επίδραση της μήτρας προερχόμενη από τα συστατικά του πλάσματος. Στην περίπτωση του ισοθειοκυανικού φαινυλίου το LOQ της μεθόδου ήταν ~2,5 φορές πιο υψηλό στο πλάσμα σε σχέση με το δανσυλοχλωρίδιο, παρόλο που οι κλίσεις των καμπυλών αναφοράς πρότυπων διαλυμάτων ήταν ισοδύναμες. Τέλος, από τη μελέτη επίδρασης της μήτρας βρέθηκε ότι το δανσυλοχλωρίδιο εμφανίζει καταστολή ιοντισμού κατά ~50%, ενώ το ισοθειοκυανικό φαινύλιο εμφανίζει ενίσχυση ιοντισμού κατά ~65%.Στο δεύτερο μέρος της διατριβής αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μέθοδος προσδιορισμού της D-πενικιλλαμίνης σε ανθρώπινο πλάσμα με την τεχνική LC-ESI-MS σε συνδυασμό με παραγωγοποίηση. Μελετήθηκαν και βελτιστοποιήθηκαν διάφορα στάδια προκατεργασίας του δείγματος που περιλαμβάνει δύο διαφορετικά αντιδραστήρια παραγωγοποίησης χλωρομυρμηκικού αιθυλεστέρα (ethyl chlorofomate) και ακρυλικού μεθυλεστέρα (methyl acrylate), 3 αναγωγικά αντιδραστήρια (ασκορβικό οξύ, τετραϋδροβορικό νάτριο και TCEP), διαλύτες για την καταβύθιση πρωτεϊνών και οργανικοί διαλύτες, καθώς και μίγματα αυτών, για τον καθαρισμό του δείγματος με υγρό-υγρό εκχύλιση. Στο τρίτο μέρος της διατριβής αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε αναλυτική μέθοδος προσδιορισμού φωσφομυκίνης με LC-APCI-MS σε ανθρώπινο πλάσμα. Στην εργασία αυτή γίνεται χρήση της κατάλυσης μεταφοράς φάσης σε κατάλυση και βελτιστοποιήθηκαν οι παράμετροι κατάλυσης μεταφοράς φάσης, η διαδικασία παραγωγοποίησης καθώς και οι χρωματογραφικές συνθήκες.