Μελέτη της μετανάστευσης και της δραστηριότητας των ινοβλαστών του επιτένοντα μετά από διατομή και συρραφή καμπτήρα τένοντα

Σκοπός: Η μελέτη της μετανάστευσης των ινοβλαστών του επιτένοντα και τηςδραστηριότητας των κυττάρων του τένοντα, σε συνθήκες που προσομοιάζουν με τηνπραγματικότητα, δηλαδή, μετά από πλήρη διατομή και συρραφή του καμπτήρα τένοντα με τροποποιημένη Kessler.Μέθοδος: 72 κόνικλοι Νέας Ζηλανδίας, 12-18 μηνών, χωριστήκανε τυχαία από 36 σε 2 κατηγορίες Α και Β. Στην Α μελετήθηκε η μετανάστευση των ινοβλαστών του επιτένοντα κατόπιν χρώσης αυτών με τη φθορίζουσα χρωστική Dil και στη Β μελετήθηκε με ανοσοϊστοχημικές χρωστικές η δραστηριότητα των κυττάρων της υπο επούλωση περιοχής.Στο δεξιό πρόσθιο άκρο ο εν τω βάθει καμπτήρας τένοντας σύρεται εκτός του ελύτρου, διατέμνεται και συρράφεται με τροποποιημένη Kessler. Σε 36 από αυτούς (ομάδα Α) εμποτίζεται με τη χρωστική Dil (1,1΄- dioctadecyl -3,3,3΄,3΄-tetramethylindocarbocyaninepercholate) και επανατοποθετείται εντός του ελύτρου όπου και καθηλώνεται περιφερικά με τη στηρικτική Kessler. Το Αρ πρόσθιο άκρο χρησιμοποιήθηκε ως μόσχευμα ελέγχου χωρίς διατομή του καμπτήρα αλλά βάφτηκε με τη χρώση Dil. Στους άλλους 36 (ομάδα Β) δε χρησιμοποιείται διεγχειρητικά καμία χρώση. Τα δείγματα μεταφέρονται σε ιστοπαθολογικόεργαστήριο όπου και βάφονται με τις ανοσοϊστοχημικές χρωστικές Ki-67, CD-68, EGF-R, anti-P53. Τα ιστοτεμάχια από 5 κόνικλους λαμβάνονται και εξετάζονται σε μικροσκόπιο φθορισμού 1,3,5,7,14,28,42 ημέρες μετεγχειρητικά και 1 κόνικλος την 84η ημέρα πιλοτικά.Στην Α ομάδα μελετήθηκε η μετανάστευση των μαρκαρισμένων με Dil ινοβλαστών κάτω από φθορίζον μικροσκόπιο, ενώ στη Β ομάδα μελετήθηκε η μεταβολική δραστηριότητα των κυττάρων της περιοχής με ανοσοϊστοχημικές μεθόδους για όλες τις χρονικές περιόδους.Αποτελέσματα: Προκειμένου να μελετηθεί η χρωστική Dil, η μετανάστευση τωνινοβλαστών χωρίστηκε σε 4 φάσεις: 1) όλα τα βαμμένα κύτταρα στην επιφάνεια του τένοντα, 2) σποραδική μετανάστευση κάτω από την επιφάνεια του τένοντα, 3) αθρόα μετανάστευση κάτω από την επιφάνεια του τένοντα, 4) βαθύτερα στον ενδοτένοντα. Διαπιστώθηκε ότι η συντριπτική πλειονότητα των ινοβλαστών του επιτένοντα βρίσκεται στην 1η φάση από τοπρώτο 24ωρο, στην 3η φάση κατα την 3η ημέρα, ενώ από την 5ημέρα και μετά στην 4η φάση.Στη Β ομάδα μελετήθηκε η ενδεικτική πρόσληψη των ανοσοϊστοχημικών χρώσεων από τα κύτταρα στον επιτένοντα και στον ενδοτένοντα. Παρατηρήθηκε αυξημένη πρόσληψη Ki-67, CD-68, EGF-R από τις πρώτες ημέρες στον επιτένοντα και από την 5η ημέρα στον ενδοτένοντα. Απόπτωση των κυττάρων (anti-P53) διαπιστώθηκε στον ενδοτένοντα τις πρώτες δύο εβδομάδες.Συμπεράσματα: Η ενεργοποίηση των ινοβλαστών του επιτένοντα είναι άμεση. Ημετανάστευσή τους ξεκινά νωρίς από την 1η ημέρα και κορυφώνεται κάτω από τονεπιτένοντα από την 3η ημέρα, ενώ βαθύτερα στον ενδοτένοντα αργότερα. Τα κύτταραυπεύθυνα για την επούλωση αναπτύσσονται αρχικά στον επιτένοντα και στην περιοχή της τομής και πολλαπλασιάζονται πιο γρήγορα απ’ότι στον ενδοτένοντα όπου και αποπίπτουν τις πρώτες δύο εβδομάδες για αδιευκρίνιστο λόγο__