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Eigenschaften des Elektronentransportsystems von Mitochondrien des Protisten Acanthamoeba castellanii Neff. II. Reinigung und Eigenschaften der NADH‐Akzeptor‐Oxydoreduktase des Elektronentransportsystems
Author(s) -
FOUQUET H.
Publication year - 1973
Publication title -
the journal of protozoology
Language(s) - English
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 1.067
H-Index - 77
eISSN - 1550-7408
pISSN - 0022-3921
DOI - 10.1111/j.1550-7408.1973.tb00889.x
Subject(s) - chemistry , sephadex , microbiology and biotechnology , biochemistry , enzyme , biology
ZUSAMMENFASSUNG. Es wird die Reinigung einer mitochondrialen NADH‐Akzeptor‐Oxydoreduktase (EC. 1.6.99.3) über folgende Stufen beschrieben: fraktionierte Ammonsulfatfällung, Chromatographie an DEAE‐Cellulose und Molekularsiebchromatographie an Sephadex G 100. Das gewonnene Enzympräparat erwies sich als elektrophoretisch rein. Die Michaeliskonstante für NADH als einziges Substrat liegt bei 6,9 × 10 −5 M NADH. Ein ebenfalls isoliertes extramitochondriales Enzym underscheidet sich vom intramitochondrialen in drei voneinander unabhängigen Eigenschaften: Substratspezifität, elektrophoretiche Mobilität, Molekulargewicht. Das isolierte intramitochondriale Enzym verhält sich gegenüber Atmungsketteninhibitoren ähnlich wie isolierte Mitochondrien. SYNOPSIS. Mitochondrial NADH reductase (EC. 1.6.99.3) was isolated from Acanthamoeba castellanii by the following steps: fractionation by (NH 4 ) 2 SO 4 precipitation, DEAE‐cellulose chromatography, and chromatography on Sephadex G 100 columns. Purity of the enzyme preparation was demonstrated by electrophoresis. With NADH as the sole substrate, the K m = 6.9 × 10 −5 M NADH. Extramitochondrial enzyme, also isolated from the ameba, differed from the mitochondrial one in substrate specificity, electrophoretic mobility, and molecular weight. The mitochondrial NADH reductase and isolated mitochondria were affected in the same way by respiratory chain inhibtors.