Quantitative Determination of Phenytoin and Phenobarbital in Capillary Blood by Ames Seralyzer

Summary: We evaluated the use of serum obtained from capillary blood specimens with the Seralyzer ARIS (AMES Division Miles Laboratories) assay for phenytoin (PHT) and phenobarbital (PB). The Ames Seralyzer method is capable of measuring PHT and PB concentrations in 10 μl of serum. Therefore, it may be used to measure concentrations of these drugs in small blood samples, such as obtained by skin puncture and capillary tube collection. In this study, simultaneous venous and capillary samples were obtained from 90 patients with epilepsy. Seralyzer results were compared with serum values from venous blood determined with a gas chromatographic (GC) method. Comparison of PHT values obtained by Seralyzer (Y s ) versus GC by linear regression gave the equation: Y s = 0.36 + 0.88 × (r 2 = 0.93, n = 63). The mean difference between the Seralyzer and GC was ‐0.96 μg/ml (p < 0.001). For PB, the equation was: Y s = ‐0.53 + 1.07 × (r 2 = 0.93, n = 31) with a mean difference of +1.28 μg/ml (p = 0.02). RÉSUMÉ Nous avons analysé 'usage possible du sérum obtenu à partir de sang capillaire pour le dosage par Seralyzer ARIS (division AMES des Laboratoires Miles) de la phénytoïne (PHT) et du phénobarbital (PB). Le Seralyzer Ames est capable de doser la PHT et le PB dans 10 microlitres de sérum. Il peut done être utilisé pour mesurer les concentrations des médicaments dans de petits échantillons sanguins, comme le sang capillaire obtenu par ponction cutanée. Dans cette étude, nous avons recueilli simultanément des échantillons de sang veineux et de sang capillaire chez 90 patients épileptiques. Les résultats obtenus par Seralyzer ont été compareés à ceux obtenus sur le sang veineux par la chromatographic en phase gazeuse (CPG). La comparaison par régression linéaire des taux de PHT obtenus par Seralyzer et par CPG donne 'équation suivante: Y s = 0.36 + 0.88 × (r 2 = 0.93, n = 63). La différence moyenne entre Seralyzer et CPG est de ‐0.96 μg/ml (p < 0.001). Pour le PB, 'équation est la suivante: Y s = ‐0.53 + 1.07 × (r 2 = 0.93, n = 31), avec une différence moyenne de + 1.28 jig/ml (p = 0.02). RESUMEN Los autores han evaluado la utilización del suero obtenido de muestras de sangre capilar con un Seroanalizador ARIS (AMES, División de Laboratorios Miles) para la fenitoína (PHT) y el fenobarbital (PB). El métido del Seroanalizador Ames es capaz de medir concentraciones de PHT y PB en 10 microlitros de suero. Por lo tanto puede ser utilizado para la medida de concentraciones de estas drogas en muestras pequefñas de sangre como las que se obtienen mediante punción cutánea y colección en tubo capilar. En este estudio también se obtuvieron muestras simul‐táneas de sangre venosa de 90 enfermos con epilepsyía. Los resultados del Seroanalizador fueron comparados con los valores de suero de sangre venosa analizados mediante el método de cromatografía de gases (GC). La comparación de los valores de la PHT obtenidos con el Seroanalizador (Y s ) comparandolos con los GC mediante una regresion lineal resultaron en la ecuaci4oAn: Y s = 0.36 + 0.88 × (r 2 = 0.93, n = 63). La diferencia media entre el Seroanalizador y la GC fue de ‐0.96 μg/ml (p < 0.001). Para el PB la ecuación fue: Y 5 = ‐0.53 + 1.07 × (r 2 = 0.93, n = 31) con una diferencia media de + 1.28 μg/ml (p = 0.02). ZUSAMMENFASSUNG Wir untersuchten die Anwendung von kapillar gewonnenen Blutproben fur den Seralyzer ARIS (AMES Division Miles Laboratories) zur Prüfung von Phenytoin (PHT) und Phenobarbital (PB). Mit der Ames Seralyzer Methode kann man PHT‐ und PB‐Konzentrationen in 10 μl Serum feststellen. Deshalb wäre diese Methode für kleine Blutproben geeignet, so z.B. bei Hautpunk‐tionen oder bei Kapillarröhrchenproben. In dieser Untersuchung wurden simultan venöse und kapilläre Proben von 90 Epilepsiekranken gewonnen. Die Seralyzer‐Werte wurden mit den gas‐chromatographisch ermittelten venösen Werten verglichen. Die Gegenüberstellung von Seralyzer (Y s ) und GC‐Werten für PHT ergab bei linearer Regression die Gleichung: Y s = 0.36 + 0.88 × (r 2 = 0.93, n = 63). Die durchschnittliche Differenz zwischen Seralyzer und GC lag bei ‐0.96 μg/ml (p < 0.001). Für PB lautet die Gleichung: Y x = 0.53 + 1.07 × (r 2 = 0.93, n = 31)mit einer durchschnittlichen Abweichung von + 1.28 µg/ml (p = 0.02).