Carbamazepine Determination in Saliva of Children: Enzyme Immunoassay (EMIT®) Versus High Pressure Liquid Chromatography

Summary: Concentrations of carbamazepine (CBZ) in salivary specimens from epileptic children receiving CBZ monotherapy were measured by EMIT® and high pressure liquid chromatography (HPLC). A highly significant linear correlation was obtained between the two methods. Statistical analysis indicated significantly greater CBZ concentrations by EMIT than by HPLC, probably due to interference in the EMIT assay by the main metabolite, carbamazepine‐10,11‐epoxide (EP). For patients on monotherapy this difference would appear not to be great enough to lead to misinterpretation of the result in clinical practice. However, with combined therapy, interference by EP in the salivary measurement of CBZ by EMIT may well become a problem. The main advantage of HPLC is that it is specific for CBZ; also, it can separate and quantify EP concurrently, which may be beneficial if EP is shown to have antiepileptic activity in man. In this study of epileptic children on monotherapy, the salivary concentration ratio EP/CBZ showed large variations both within and between patients, with a mean of 31.6% and an overall range of 6.8–67.1%. RÉSUMÉ Les concentrations de Carbamazepine (CBZ) dans des échantillons de salive d'enfants épileptiques en monothérapie par la CBZ ont ete mesurées par la technique EMIT et par HPLC. Une correlation linéaire hautement significative a été obtenue entre les deux méthodes. L'analyse statistique montrait des concentrations de CBZ significativement plus élevées par la technique EMIT que par HPLC, cette différence étant due probablement a l'interference dans la technique EMIT du principal metabolite le 10–11 epoxy‐Carbamazepine (EP). Chez les patients en monothérapie cette différence n'était pas assez grande pour conduire a une mauvaise interprétation du résultat dans la pratique clinique. Mais, en polythérapie, cette interference par l'EP dans le dosage salivaire de la CBZ par la technique EMIT peut devenir un probleme. L'avantage principal de l'HPLC est qu'elle est spéciflque pour la CBZ et peut permettre de separer et quantifier l'EP en même temps, ce qui peut etre in‐teressant si Ton demontre que l'EP a une activité antiepileptique chez l'homme. Dans cette etude d'enfants épileptiques en monotherapie le rapport des concentrations salivaires EP/CBZ montrait de grandes variations à la fois chez et entre les patients, avec une moyenne de 31,6% et des extrêmes de 6,8 à 67,1%. RESUMEN Se nan medido, mediante EMIT y HPLC, las concentraciones salivares de Carbamazepina (CBZ) en niños que recibían CBZ, como monoterapia. Se obtuvo una correlación linear entre los dos métodos altamente significativa. El analisis estadístico mostró concentraciones de CBZ significativamente más altas con EMIT que con HPLC probablemente debidas a una interferencia, en el ensayo EMIT, del mayor metabolito carbamazepina‐10, 11‐epoxido (EP). En los enfermos con monoterapia esta diferencia no sería lo suficientemente elevada como para conducir a una in‐terpretación falsa en la practica clinica. Sin embargo, en terapia combinada, la interferencia del EP en las determinaciones salivares de CBZ con EMIT puede presentar problemas. La mayor ventaja de HPLC con‐siste en su especificidad para la CBZ y tambien en su capacidad de separar y cuantificar simultáneamente el EP, lo que puede resultar beneficioso si se demuestra que el EP posee actividad antiepileptica en el hombre. En este estudio de niños epilépticos en monoterapía, la relación de las concentraciones salivares EP/CBZ mostró amplias variaciones en el paciente y entre los pacientes con un promedio de 31.6% y un rango general de 6.8–67.1%. ZUSAMMENFASSUNG Die Konzentration von Carbamazepin (CBZ) im Speichel epileptischer Kinder mit Carbamazepin‐Monotherapie wurde mittels EMIT und HPLC gemessen. Hierbei fand sich eine hochsignifikante lineare Korrelation zwischen beiden Methoden. Die statis‐tische Auswertung ergab eine signifikant höhere Car‐bamazepinkonzentration, gemessen mi der EMIT‐Methode als mit der HPLC, möglichwe ise bedingt durch die Differenz des Hauptmetaboliten Car‐bamazepin‐10, 11‐Epoxyd (EP) in der EMIT‐Methode. Fur Patienten mit Monotherapie sollte diese Differenz nicht so gravierend sein, daß sie zu Fehlinterpreta‐tionen des klinischen Erfolges führen kann. Jedoch kann bei Ko‐Medikation die Interferenz des EP bei Bestimmung des Carbamazepins im Speichel mit der EMIT‐Methode problematisch werden. Der Haupt‐vorteil der HPCL ist, dafi sich Carbamazepin und EP getrennt und gleichzeitig quantitativ bestimmen lassen, was sich günstig auswirken kann, wenn es erwiesen ist, daß EP beim Menschen eine antiepileptische Wirkung besitzt. In dieser Studie zeigte die Konzentration von EP/CBZ im Speichel antiepileptischer, monother‐apierter Kinder größe intra‐ und interviduelle Schwan‐kungen mit einem Mittelwert von 31,6%, von 6,8% bis 67,1% reichend.