Contribution analytique à la détermination de la pureté et du degré de polymérisation de l'Acide Hyaluronique

Résumé De par ses propriétés physico‐chimiques et son rǒle biologique tissulaire, l'Acide Hyaluronique s'avère une molécule de choix pour la formulation cosmétique. Les divers échantillons commerciaux présentent des teneurs variables en chondroitines sulfates, composants biologiques naturellement associés. D'un point de vue analytique, les auteurs ont étudié la possibilité de séparer l'Acide Hyaluronique des chondroitines sulfates par une méthode simple et rapide, laquelle ne nécessite qu'une infime quantité de produit à tester. Pour ce faire, ils utilisent la chromatographie par perméation de gel ou chromatographie de type exclusion. Les chromatogrammes obtenus par cette technique permettent de visualiser l'Acide Hyaluronique et les chondroitines sulfates sous forme de deux pics juxtaposés dont les surfaces sont proportionnelles aux teneurs respectives des deux polysaccharides. Le profil configurationnel du pic correspondant à l'Acide Hyaluronique et son volume de rétention apportent de précieux renseignements sur le caractère polymérisé de l'échantillon. Comparéà un étalon connu, il est possible en 30 minutes de déterminer les pourcentages respectifs en Acid Hyaluronique et chondroitines sulfates d'un échantillon et de préciser le degré de polymérisation de celui‐ci. Analytical contribution to the determination of the purity and the degree of polymerization of Hyaluronic Acid Hyaluronic Acid (H.A.) is of importance in cosmetic formulation because of its physical chemical properties and its role in biological tissues; it occurs in association with chondroitin sulphates and a method of analysis of separating the two substances has been developed. The method is based on gel permeation chromatography, or ‘exclusion’chromatography, and requires extremely small quantities of product. The conditions which have been found give two neighbouring peaks of which the surfaces are proportional to the contents of H.A. and the chondroitin sulphates. In addition to the quantity, the shape of the H.A. peak and the relative retention volume give further information as to the polymerization character of the sample. Using a known control sample it is possible, in 30 minutes, to determine the relative proportions of the polysaccharides H.A. and chondroitin sulphates and to determine the degree of polymerization of the H.A. Results are given of the analysis of a commercial sample of H.A.