Cytopathological, Negative Staining and Serological Electron Microscopy of a Clostero‐like Virus Associated with Pear Vein Yellows Disease

Ultrastructural and immunocytochemical studies were made on thin sections of Nicotiana occidentalis leaves systemically infected with a clostero‐like virus associated with pear vein yellows. The virus particles were also studied in negative stain and by the decoration technique. Virus‐like particles were seen only in mesophyll parenchyma cells, usually arranged in long bundles. An antiserum to apple stem pitting virus gave positive gold labelling of the virion aggregates. Labelling intensity was higher using IgG‐gold than with protein A‐gold. Osmium tetroxide postfixation did not adversely affect the labelling. Virus particle morphology in negative stain resembled that of closteroviruses, although the cytopathic effects in many respects did not resemble those caused by closteroviruses; the cytoplasmic vesicles characteristic of closterovirus infections were not observed. Zusammenfassung Zytopathologische negative Färbung und serologische Elektronenmikroskopie eines clostero‐ähnlichen Virus, assoziiert mit der pear vein yellow Krankheit Ultrastrukturelle‐ und immunozytochemische Untersuchungen wurden an dünnen Schnitten von Nicotiana ocddentalis ‐Blättern, die systemisch mit einem clostero‐ähnlichen Virus, assoziiert mit pear vein yellows, infiziert waren, durchgeführt. Die Viruspartikeln wurden auch bei der Negativfarbung und der Dekorations‐Technik untersucht. Virus‐ähnliche Partikeln wurden nur in Mesophyllparenchymzellen beobachtet, normalerweise in langen Bündeln orientiert. Ein gegen das apple stem pitting virus entwickeltes Antiserum verursachte eine positive Gold‐Markierung der Virionaggregate. Die Intensität der Markierung war mit IgG‐jGold höher als mit Protein‐A‐Gold. Eine Nachfixienmg mit Osmiumtetroxid beeinfiußte die Markierung nicht. Die Viruspartikelmorphologie in der Negativ‐Farbung war die der Closteroviren ähnlich, obwohl die zytopathologischen Einflüsse in vielen Hinsichten den durch Glosteroviren verursachten Einflüsse nicht ähnlich waren. Die zytoplasmatischen Vesikel, die bei Glosterovirusinfektionen charakteristisch sind, wurden nicht beobachtet.