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Beet Necrotic Yellow Vein Virus: Purification, preparation of Antisera and Detection by Means of ELISA, and Electro‐Blot Immunoassay
Author(s) -
Koenig R.,
Lesemann D.E.,
Burgermetster W.
Publication year - 1984
Publication title -
journal of phytopathology
Language(s) - German
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.53
H-Index - 60
eISSN - 1439-0434
pISSN - 0931-1785
DOI - 10.1111/j.1439-0434.1984.tb00768.x
Subject(s) - immunoassay , microbiology and biotechnology , antiserum , western blot , biology , virus , antibody , dot blot , virology , blot , biochemistry , dna , immunology , gene
The best results in attempts to purify beet necrotic yellow vein virus were obtained with a slightly modified Triton × 100 method originally described by H ull et al. (1976) for cauliflower mosaic virus. Immunosorbent electronmicroscopy (ISEM), the double antibody sandwich form of enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) and electro‐blot immunoassay (EBIA) yielded similar result when sugar beets were tested for the presence of virus. ISEM and EBIA ofer the advantage that in addition to serology a second parameter, i.e. either particle morphology or coat protein molecular weight, is used to identify the virus. Specific and possibly nonspecific reactions are thus more readily distinguished and antisera can be used which may still contain some antibodies to normal plant constituents. However, with these methods only a limited number of samples can be studied at a time, therefore ELISA is presently the method of choice for large scale routine testing. Zusammenfassung Beet necrotic yellow vein virus: Reindarstellung, Herstellung von Antiseren Und Nachweis Mit Hilfe von ELISA, Immunosorbent electronmicroscoy und Electro‐Blot Immunoassay Bei Versuchen Zur Reindarstellung des beet necrotic yellow vein virus wurden die besten Ergebnisse mit einer leicht modifiziertem Triton × 100 Methode erzielt, die ursprüng für das cauliflower mosaic virus von H ull et al. (1976) entwickelt worden war. Immunosorbent electronmicroscopy (ISEM), double antibody‐sandwid, ELISA und electro‐blot immunoassay (EBIA) ergaben ähnliche Resultate bei der Unteuchung von Zuckerrübenwurzelproben. ISEM und EBIA haben den Vorteil, daß neber der scrolognchen Reaktivität noch ein zweites Merkmal zum Nachweis des Virus eingeserz wird, bei ISEM die Partikelmorphologie und bei EBIA das Molekulargewicht des Hüllprodtim badurda kännen spezifische und eventuell unspezifische Reaktionen besser unterschreden werden und es können Antiseten verwendet werden, die noch Antikörper gegen normale Pflauzenbestandteile enthalten. Da mit diesen Methoden jedoch nur eine begrenzte Anzabl von Probcagleichzeitig untersucht werden kann, ist für Massenuntersuchungen ELISA die Methode der Wahl.