WESTERN blot analysis of plasma components of the three Tilapia species, Oreocbromis aureus, O. niloticus and Sarotherodon galilaeus

Summary In past studies erformed to differentiate among commercially important species of the Tilapia group, erythrocytes o the different species were successfully investigated in agglutination tests with lectins and Tilapia antisera. The present publication reports on WESTERN blot analyses of humoral plasma proteins from Oreocbromis aureus (S teindachner 1864), O. niloticus (Linne 1766) and Sarotherodon galilaeus (A rtedi 1757). For lectin blots, in addition to comlete plasma samples, N‐acetyl glucosamine tearing plasma glycoproteins were investigated after their affinity‐chromatographical isolation from the plasma using a WGA agarose column. For immunoblots, only complete plasma samples were used. After SDS treatment the samples were electrophoretically separated and transferred onto nitrocellulose membranes. The transferred proteins were then tested for their reactions with lectins and antisera. In all cases the employed indicator molecules showed species‐specific differences, enabling a clear identification of the investigated species. In addition, molecular weights of all native SDS‐treated plasma proteins of the 3 Tilapia species are listed in an appendix. Zusammenfassung WESTERN Blot‐Analyse von Plasmakomponenten der drei Tilapia‐Arten Oreochromis aureus, O. niloticus und Sarotherodon galilaeus In früheren Untersuchungen zur Unterscheidung wirtschaftlich wichtiger Arten der Gattung Tilapia wurden deren Erythrozyten in Agglutinationstests mit verschiedenen Lektinen und Tilapia‐Antiseren erfolgreich eingesetzt. Die vorliegende Publikation zur gleichen Fragestellung beschreibt WESTERN‐Blot‐Analysen humoraler Plasma‐Proteine der Arten Oreocbromis aureus (S teindachner 1864), O. niloticus (L inne 1766) und Sarotherodon galilaeus (A rtedi 1757). Fur Lektin‐Blots wurden neben Gesamtplasmaproben auch N‐Acetyl‐Glucosaminhaltige Glykoproteine eingesetzt, die affinitätschromatographisch mit Hilfe einer WGA‐Agarose‐Säude aus dem Plasma isoliert worden waren, während fur Immunoblots nur Proben von Gesamtplasma verwendet wurden. Nach SDS‐Behandlung und elektrophoretischer Auftrennun wurden die Proben auf Nitrocellulose‐Membranen übertragen. Die transferierten Proteine wurden jann auf ihre Reaktion mit Lektinen und Antiseren getestet. In allen Fällen zeigten die eingesetzten Indikatormoleküle artspezifische Unterschiede an, die eine klare Differenzierung zwischen den untersuchten Arten erlaubten. In einem Anhang sind zudem die Molekulargewichte sämtlicher nativer und SDS‐behandelter Plasmaproteine der 3 Tilapia‐Arten aufgelistet.