Phagocytosis activity as an in vitro test for the effects of chronic exposure of rainbow trout to Linuron, a herbicide

Summary The effect was examined of chronic exposure of young rainbow trout ( Oncorhynchus mykiss Kendall) to a herbicide, N'‐(3,4 dichlorophenyl)‐N‐methoxy‐N‐methylurea (Linuron). Three groups of fish were exposed to concentrations of Linuron of 30 ng/ml, 120 ng/ml and 240 ng/ml. The control grou was kept under identical conditions except that no Linuron was added to the aquarium water. At the end of the experiment blood was drawn by cardiac puncture. The isolated leukocytes were incubated over 2 hours with fluorescent plastic beads at either 4°C or 20°C. As a functional parameter, the percentage of cells that had taken up more than one particle was evaluated by flowcytometry. At a concentration of Linuron of 30 ng/ml the phagocytotic activity was lowest both at 4°C and at 20°C. With increasing herbicide concentration the percentage of phagocytic cells increased again. Résumé Activité phagocytaire comme test des effects de Linuron, un herbicide, sur la truite arc‐en‐ciel pendant une exposition chronique L'effet de l'exposition chronique á l'herbicide N'‐(3,4 dichlorphenyl)‐N‐methoxy‐N‐methyluéte (Linuron), a été examiné chez des truites arc‐en‐ciel ( Oncorhynchus mykiss , Kendall) jeunes. Trois groupes de poissons ont iti soumis sà des concentrations de Linuron de 30 ng/ml, 120 ng/d et 240 ng/ml endant 35 jours. Le groupe contrde a été soumis aux mêmes conditions, en omettant le Linuron dans l'eau de l'aquarium. A la fin de l'expérience, le sang a été recueilli par ponction cardiaque. Les leucocytes isolés ont été incubés pendant deux heures avec des billes de plastique fluorescentes sà 4° ou sà 20°C. Le pourcentage de cellules ayant phagocyté plus d'un particule (paramètre fonctionnel), a été calculé par cytométrie de flux. A une concentration de Linuron de 30 ng/ml, l'activité phagocytaire était la plus basse non seulement sà 4°C mais encore sà 20°C. Le pourcentage de cellules phagocytaires augmentait aux concentrations de l'herbicide plus élevées. Zusammenfassung Phagozytoseaktivitát als ein in vitro‐Test für die chronischen Wirkungen von Linuron auf Regenbogen forellen Es wurde der Effekt einer chronischen Behandlung mit einem Herbizid (N'‐(3,4 dichlorphenyl)‐N‐methoxy‐N‐methylharnstoff, Linuron) auf junge Regenbogenforellen ( Oncorhynchus mykiss , Kendall) untersucht. Drei Fischgruppen wurden über 35 Tage Linuronkonzenuatioden von 30 ng/ml, 120 ng/ml oder 240 ng/ml im Hälterwasser ausgesetzt. Die Kontrollgrupe wurde unter gleichen Bedingungen ohne Herbizidzugabe gehältert. Am Versuchsende wurde dn Fischen mittels Herzpunktion Blut enmommen. Die aus diesem Blut isolierten Leukozyten wurden für 2 h zusammen mit fluoreszierenden Partikeln entweder bei 4°C oder 20°C inkubiert. Als funktioneller Parameter wurde der Prozentsatz der Zellen die mehr als ein Partikel phagocytiert hatten mittels Durchfluißcytometrie ermittelt. Es zeigte sich, daß bei 30 ng Linuron pro ml Wasser sowohl bei 4°C als auch bei 20°C die geringste Phagocytose‐rate meßbar war. Mit steigender Herbizidkonzentration nahm dann die Phagocytose wieder zu.