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Use of the Acridine Orange Staining on Smears of Human Spermatozoa after Heat‐Treatment: Evaluation of the Chromatin Condensation/Die Anwendung von Acridin‐Orange zur Färbung menschlicher Spermatozoen in Ausstrichen nach Hitzeeinwirkung: Auswertung der Chromatinkondensation
Author(s) -
Roux C.,
Dadoune J.P.
Publication year - 2009
Publication title -
andrologia
Language(s) - English
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.633
H-Index - 59
eISSN - 1439-0272
pISSN - 0303-4569
DOI - 10.1111/j.1439-0272.1989.tb02410.x
Subject(s) - acridine orange , chromatin , sperm , semen , staining , andrology , biology , microbiology and biotechnology , chemistry , dna , anatomy , biochemistry , medicine , genetics
Summary: A simple, rapid procedure was described to evaluate the degree of chromatin compactness in human spermatozoa. Smears of fixed spermatozoa were heat‐treated and stained with acridine orange. Smears from the same sperm samples were also stained with acidic aniline blue. Three groups of semen could be distinguished according to the percentage of red sperm heads observed under fluorescence microscope. 1) Semens with spermatozoa whose chromatin appeared normal before and after heat‐treatment. 2) Semens with spermatozoa whose chromatin appeared normal before and abnormal after heat‐treatment. 3) Semens with spermatozoa whose chromatin appeared abnormal before and after heat‐treatment. The positive correlation between the percentages of red heads and the percentages of blue stained heads suggests that modifications in the biochemical composition of the basic protein component associated with DNA are responsible for the denaturation process. Zusammenfassung: Es wird eine einfache schnelle Methode zur Bestimmung der Chromatindichte in menschlichen Spermatozoen beschrieben. Ausstriche fixierter Spermatozoen werden mit Hitze behandelt und mit Acridin‐Orange gefärbt. Vom gleichen Ejakulat werden Ausstriche auch mit saurem Anilinblau gefärbt. Fluoreszenzmikroskopisch können drei Gruppen bezüglich des prozentualen Anteils rotgefärbter Spermatozoen unterschieden werden. 1. Ejakulate mit Spermatozoen, deren Chromatin vor und nach Hitzeeinwirkung normal ist 2. Ejakulate mit Spermatozoen, deren Chromatin vor Hitzeeinwirkung normal, nachher jedoch pathologisch und 3. Ejakulate mit Spermatozoen, deren Chromatin sowohl vor als auch nach Hitzeeinwirkung anormal sind. Die positive Korrelation zwischen dem prozentualen Anteil rotgefärbter und blaugefärbter Spermatozoen weist daraufhin, daß Modifikationen der biochemischen Zusammensetzung von basischen Proteinkomponenten und DNA für den Denaturierungsprozeß verantwortlich sind.