Activity and Localization of NADH‐dependant Oxidoreductase (Diaphorase) in Boar Spermatozoa

Summary: Investigations were carried out into the activity and localization of NADH‐dependant diaphorase in boar spermatozoa. Semen samples were collected from healthy boars, used in A.I. centers. The enzyme was extracted with distilled water and Triton X‐100. Two forms of diaphorase were found‐water‐soluble and Triton X‐100 soluble, showing low activity‐0,36U/ml and 0,26U/ml. The enzyme was localized in the mitochondria, manifesting different intensities of reaction between sperm cells in the same ejaculate. It was found, that a part of the mitochondria and outer doublets showed positive reaction. It is suggested that the enzyme regulates the ratio between reduced and oxidized forms of NADH, takes part in the energy balance and possibly in the mechanism of sperm motility. Zusammenfassung: Aktivität und Lokalisation von NADH‐abhängiger Oxydoreduktase {Diaphorase) in Eberspermatozoen Die Aktivität der NADH‐abhängigen Diaphorase wurde in Sperma‐tozoen von Ebern untersucht. Das Ejakulat hierfür wurde von gesunden Ebern gesammelt, die im A.I. Zentrum gehalten wurden. Die Extraktion des Enzyms erfolgte mit destilliertem Wasser und Triton X‐100. Dabei ergab sich, daß zwei verschiedene Formen der Diaphorase gefunden werden konnten und zwar wasserlöslich und Triton X‐100 löslich, die eine niedri‐ge Aktivität (‐ 0,36U/ml und 0,26U/ml) aufwiesen. Das Enzym war in den Mitochondrien lokalisiert und bewirkte eine verschiedene Reaktionsintensität zwischen den Spermazellen im selben Ejakulat. Es fand sich, daß ein Teil der Mitochondrien und der äußeren Hüllen eine positive Reaktion zeigten. Es ist wahrscheinlich, daß das Enzym die Relation zwischen reduzierter und oxidierter Form der NADH reguliert, bei der Energiebalance und mögli‐cherweise auch beim Mechanismus der Samenbeweglichkeit eine Rolle spielt.