Stimulation of Protein Synthesis in Pachytene Primary Spermatocytes from the Human Testis by Pyruvate

Summary:  A sequential enzymatic incubation in collagenase and trypsin was carried out to yield a suspension of viable single cells from the seminiferous epithelium of adult human testis. The cell suspension predominantly consisted of pachytene primary spermatocytes (15%), round spermatids (32%), and condensing spermatids and residual bodies (21%). Human pachytene spermatocytes were isolated by unit gravity sedimentation using the methods originally developed for murine tissue. The spermatocyte‐enriched fraction was 79% pure. When the effect of energy sources on protein synthesis by spermatocytes was examined, the highest rate of protein synthesis with pyruvate was found among four kinds of substrates added at a concentration of 10 mM. As shown with murine spermatocytes, the rate of protein synthesis by the human spermatocytes is probably regulated by pyruvate. Zusammenfassung:  Aufeinanderfolgende enzymatische Inkubation in Kollagenase und Trypsin wurde durchgeführt, um als Ertrag eine Suspension mit lebensfähigen einzelnen Zellen des Tubuli seminiferi‐Epithels von Hoden erwachsener Männer zu liefern. Die Zellsuspension enthielt vorherrschend Frühspermatozyten im Pachytän (15%), Rundspermatiden (32%), Spermatiden im Kondensationsstadium und Residualkörperchen (21%). Menschliche Spermatozyten im Pachytän wurden durch einheitliche Schwerkraftsedimentation unter Anwendung der Originalmethode isoliert, die für Rattengewebe entwickelt wurde. Die Fraktion, die mit Spermatozyten angereichert wurde, hatte einen Reinheitsgrad von 79%. Als die Wirkung der ursächlichen Energiequelle untersucht wurde, ergab sich der höchste Grad der Pyruvat‐Proteinsynthese unter vier Substratarten bei einer Konzentration von 10 mMol. Wie schon bei Rattenspermatozyten gezeigt werden konnte, ist der Grad der Proteinsynthese menschlicher Spermatozyten möglicherweise durch Pyruvat reguliert.