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A Modified Enzyme‐Linked Immunosorbent Assay (ELISA) for the Detection of Antisperm Antibodies
Author(s) -
WOLFF H.,
SCHILL W.B.
Publication year - 2009
Publication title -
andrologia
Language(s) - English
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.633
H-Index - 59
eISSN - 1439-0272
pISSN - 0303-4569
DOI - 10.1111/j.1439-0272.1985.tb01033.x
Subject(s) - antibody , enzyme , microbiology and biotechnology , biology , chemistry , immunology , biochemistry
Summary: To find optimal test conditions of an indirect enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antisperm antibodies (ASA), several variations (solid phases, antigen load, incubations etc.) have been performed. In contrast to the so far used polystyrene microtiter plates, which have to be coated with spermatozoa by the help of glutaraldehyde, we applied positively charged PVC microtiter plates being able to adsorb unfixed spermatozoa and thus avoiding alteration of spermatozoal antigens by glutaraldehyde. The ELISA proved to be more sensitive than conventional methods, e.g. the GAT, the SIT and the TAT, and also more effective since the technique allows screening of more than one hundred test samples for ASA within one day. First results are presented evaluating sera and seminal plasma of andrological and dermatological patients and ten known fertile men for ASA by the described ELISA technique. Zusammenfassung: Um die optimalen Testbedingungen eines indirekten ELISA zum Nachweis von Spermatozoenantikörpern zu ermitteln, wurden die verschiedenen Teilschritte des Enzymimmunoassays variiert (Mikrotiterplatten, Antigenkonzentration, Inkubationszeiten etc.). Im Gegensatz zu den bisher üblichen Polystyren‐Mikrotiterplatten, an die die Spermatozoen mit Hilfe von Glutaraldehyd gebunden werden, verwendeten wir positiv geladene Polyvinylchlorid‐Mikrotiterplatten, die eine Bindung der Spermatozoen ohne Glutaraldehydfixierung erlauben und dadurch mögliche Antigenalterationen sicher ausgeschlossen werden können. Der modifizierte ELISA ist empfindlicher als herkömmliche Antikörpernachweisverfahren, wie z.B. der GAT, der SIT und der TAT, und auch effektiver, denn er ermöglicht die Untersuchung von mehr als einhundert Proben innerhalb eines Tages. Erste Ergebnisse mit dem modifizierten ELISA unter Verwendung von Serum und Seminalplasma andrologischer und dermatologischer Patienten und zehn erwiesenermaßen fertiler Männer werden mitgeteilt.