Selected Enzyme Histochemistry of Sertoli Cells 1. Immature Rat Sertoli Cells in Vitro

Summary:  Sertoli cells were collected from the testes of 21 day old, sexually imature Wistar rats. The cells were then incubated for 10 or 14 days in culture medium with or without the addition of FSH. This time period corresponds to the time period in vivo when rat Sertoli cells undergo active differentiation with concomitant histochemical and morphological changes. Cells cultured 10 and 14 days after initial plating were processed for the histochemical detection of three esterases and four dehydrogenases by observing relative staining intensities of azo dye precipitation and formazan reation product, respectively. Appropriate controls were established. The presence of FSH mildly increased the staining activity of LDH, SDH and G‐6‐PDH in both 10 and 14 day cultured cells. However, SDH staining intensity/cell did not increase to surpass LDH staining intensity/cell as it does in vivo during this period of time. Addition of FSH also slightly increased staining of non‐specific esterase. Type B esterase and 3 β ‐ol DH activity was not evident in 10 and 14 day cultured cells, even in the presence of FSH. Our results indicate that, based on histochemical parameters, immature Sertoli cells do not mature in culture commensurate with the cell in vivo. Ausgewählte Enzymhistochemie der Sertolizellen 1. Unreife Ratten‐Sertolizellen in vitro Zusammenfassung:  Die Sertolizellen stammten aus den Hoden 21 Tage alter sexuell unreifer Wistar‐Ratten. Diese Zellen wurden 10 oder 14 Tage in einem Kulturmedium mit und ohne Zugabe von FSH inkubiert. Diese Zeitspanne entspricht der Zeit in vivo, in der Sertolizellen sich aktiv differenzieren, verbunden mit histochemischen und morphologischen Änderungen Die 10 und 14 Tage kultivierten Zellen wurden nach dem Initialplating zum histochemischen Nachweis von drei Esterasen und vier Dehydrogenasen durch Beobachtung relativer Färbungsintensitäten der Azo‐Farbstoff‐Präzipiation und entsprechend der Formazan‐Reaktion gebracht. Geeignete Kontrollen wurden erstellt. Die Gegenwart von FSH vermehrte die Färbeintensität von LDH, SDH und G‐6‐PDH bei den 10 und 14 Tage kultivierten Zellen mäßig. Die SDH‐Färbeintensität pro Zelle stieg jedoch nicht höher an als die LDH‐Färbeintensität pro Zelle, wie dies in vivo während dieser Zeitspanne geschieht. Gibt man FSH zu, so wird die Färbeintensität einer nicht spezifischen Esterase leicht erhöht. Typ‐B‐Esterase‐ und 3‐betaol‐DH‐Aktivität war in 10 und 14 Tage alten Zellkulturen selbst in Gegenwart von FSH nicht vorhanden. Unsere Ergebnisse zeigen, daß nach histochemischen Parametern unreife Sertolizellen in Kultur nicht in entsprechendem Umfang reifen wie dies bei Zellen in vivo geschieht.