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Enrichment of Human X‐ and Y‐Chromosome Bearing Spermatozoa by Density Gradient Centrifugation
Author(s) -
SCHILLING E.,
THORMAEHLEN D.
Publication year - 2009
Publication title -
andrologia
Language(s) - English
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.633
H-Index - 59
eISSN - 1439-0272
pISSN - 0303-4569
DOI - 10.1111/j.1439-0272.1977.tb01269.x
Subject(s) - density gradient , chromatography , centrifugation , differential centrifugation , chemistry , andrology , biology , biochemistry , physics , medicine , quantum mechanics
Summary Human spermatozoa (120–180 Mill/0.6 ml Tyrode solution) were laid on the top of a continous density gradient column consisting of 4–16% bovine serum albumin. The columns were then centrifuged at 1500–1600 rpm (200–240 g) at 20°C or 4°C for 15 min. By this procedure the spermatozoa sedimented within the tubes of normal distribution curves. The mean percentages of y‐spermatozoa gradually decreased from 62,3 ± 6,1% (max. 70%) in the upper fractions to 42,4 ± 3,8% (min. 37%) in the bottom fractions. These results could be verified by inseminations of rabbit does with spermatozoa separated by the same technique. Zusammenfassung Humanspermatozoen (120–180 Mill. in 0,6 ml Tyrode) wurden auf einen 10 ml kon‐tinuierlichen Dichtegradienten von 4–16% Rinderserum‐Albumin aufgelegt. Die Zen‐trifugationen erfolgten bei 1500–1600 U/min (200–240 g), 20°C oder 4°C für 15 min. Die Samenzellen hatten sich in dem Gradienten in Form einer Normalverteilung einge‐stellt. Die Prozentanteile von Spermatozoen mit fluoreszierenden y‐Körperchen nahmen von der obersten zur untersten Fraktion hin kontinuierlich ab; in der obersten Fraktion wurden 62,3 ± 6,1% (maximal 70%) Spermatozoen mit y‐Körperchen ermittelt, in der untersten Fraktion 42,3 ± 3,8% (minimal 37%). Diese Ergebnisse konnten durch Ver‐suche an Kaninchen bestätigt werden.