Soluble Proteins of Guinea Pig Seminal Vesicle Lumen: Purification and Partial Characterization

Summary Luminal contents of guinea pig seminal vesicle were extracted with 0.154 M NaCl and the soluble protein fraction was studied by DEAE‐cellulose and Sephadex G‐100 column chromatography; anionic, cationic, and SDS‐polyacrylamide disc gel electrophoresis; isoelectric focusing; molecular weight determinations by SDS‐polyacrylamide disc gel electrophoresis; analysis for neutral carbohydrate; sucrose density‐gradient centrifugation for determination of sedimentation coefficients; and amino acid analyses. Four protein fractions (referred to as proteins 1, 2, 3, and 4 in order of elution) were obtained by DEAE‐cellulose column chromatography. Proteins 1, 2, and 4 gave single major bands in multiple disc gel electrophoretic systems. Protein 3 gave one major band and one minor component believed to be a fragment of a primary vesicular protein. Protein 1 is very basic and probably represents the clotting protein of guinea pig semen. The three nonclotting proteins could not be detected in serum and are probably intrinsic to seminal vesicle epithelium. All four proteins were found in animals weighing 700 g or more; only two of the three nonclotting proteins were found in more than half of the younger animals. This makes it even more likely that one or more of the nonclotting proteins could serve as a useful gene marker in studies of androgen mechanisms. Zusammenfassung Bei der Aufarbeitung des Inhaltes der Samenblasen von Meerschweinchen wurden 4 Proteinfraktionen mittels der DEAE‐Cellulose‐Säulen‐Chromatographie nachgewiesen. Alle 4 Fraktionen wurden bei Tieren gefunden, die mehr als 700 g wogen. Das Protein 1 repräsentiert wahrscheinlich das Gerinnungsprotein des Meerschweinchenspermas. Die drei Nichtgerinnungsproteine konnten nicht im Serum bestimmt werden und sind wahrscheinlich wesentlich für das Samenblasenepithel. Zwei der drei Nichtgerinnungsproteine wurden in mehr als der Hälfte der Jungtiere nachgewiesen. Es wird die Frage diskutiert ob möglicherweise eins oder mehrere der Nichtgerinnungsproteine als Gen‐Markierer bei Studien des Androgenmechanismus dienen können. Resumen Se extrajo el contenido de la vesicula seminal del cobaya con CINa 0.154 M y la fractión de proteina soluble se estudió mediante cromatografia en columna de celulosa DEAE y Sephadex G‐100; electroforesis aniónica, catiónica y gel de poliacrilamida‐SDS; análisis para los carbohidratos neutros; determinatión de coefficientes de sedimentatión por centrifugación en diferentes gradientes de densidad de sucrosa; y análisis de aminoácidos. Se obtuvieron 4 fracciones proteicas (referidas como proteinas 1, 2, 3, y 4 según el orden de elución) por cromatografia en columna de celulosa DEAE. Las proteinas 1, 2, y 4 dieron una sola banda grande en múltiples sistemas electroforéticos sobre gel. La proteina 3 dió una banda mayor y un componente menor considerado como un fragmento de una proteina vesicular primaria. La proteina 1 es muy básic a y probablemente representa la proteina coagulante del semen de cobaya. Las tres proteinas no coagulantes no se pudieron detectar en el suero y son probablemente intrinsecas al epitelio de las vesiculas seminales. Las 4 proteinas se encontraron en animates con peso de 700 g. o más. Sólo dos de las tres proteinas no coagulantes se encontraron en más de la mitad de los animales más jóvenes. Esto hacemás probable que una o más de las proteinas no coagulantes pueda servir como un útil marcador génico en los estudios de mecanismos androgénicos.