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The Isolation of Epithelial Cells from the Rat Epididymis
Author(s) -
BROOKS D. E.
Publication year - 2009
Publication title -
andrologia
Language(s) - Spanish
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.633
H-Index - 59
eISSN - 1439-0272
pISSN - 0303-4569
DOI - 10.1111/j.1439-0272.1975.tb00937.x
Subject(s) - trypan blue , pronase , collagenase , epididymis , hyaluronidase , centrifugation , differential centrifugation , biology , chemistry , epithelium , andrology , biochemistry , cell , sperm , trypsin , enzyme , medicine , botany , genetics
Zusammenfassung Die Epithelzellen des Rattennebenhodens wurden durch Verdauung des kleingeschnittenen Nebenhodens mit Pronase und anschließend mit Zusatz von Kollagenase plus Hyaluronidase freigesetzt. Die Epithelzellen wurden sodann von Zellverunreinigungen durch differenzierte Zentrifugierung und Sedimentierung getrennt. Die isolierten Zellen blieben lebensfähig, wie durch den Ausschluß von Trypanblau bestätigt werden konnte. Die Zellen atmeten in Gegenwart von Glukose und die Respirationsrate war bei der folgenden Zugabe von Pyruvate nicht verändert. Resumen Las células epiteliales del epididimo se liberaron de epididimo troceado por digestión con pronasa, seguida de colagenasa más hialuronidasa. Posteriormente, se separaron las células epiteliales de las células contaminantes mediante centrifugación diferencial y sedimentación a unidad de gravedad a través de un gradiente de sucrosa en Ringer. Las células aisladas permanecían viables como se comprobó por la exclusión del azul tripón. Las células respiraban en presencia de glucosa y no se alteró la respiración por la adición subsiguiente de piruvato.

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