Scanning Electron Microscope Study of Rabbit Spermatozoa

Zusammenfassung Untersuchungen an Kaninchenspermatozoen mit Hilfe der Rasterelektronenmikroskopie Kaninchenspermatozoen aus dem Ejakulat wurden für die Untersuchung im Raster‐elektronenmikroskop in Locker'scher Lösung gewaschen, in Glutaraldehyd fixiert und entweder luftgetrocknet oder nach der “critical point”‐Methode mit Freon präpariert. Mit Hilfe dieser beiden Methoden konnten Informationen, iiber die unter der Ober‐flache der Spermatozoen liegenden Strukturen gewonnen werden. Im Spermienkopf sind zwei Zonen zu unterscheiden: die akrosomale und die post‐akrosomale Region. Das Akrosom besteht aus dem vorderen Segment, das von einer hufeisenförmigen Erhebung, dem Randwulst umgeben ist, und aus dem unter dem übri‐gen Niveau liegenden halbmondformigen aquatorialen Segment. Diese beiden Segmente sind durch begrenzte Vorwolbungen getrennt, die der sub‐akrosomalen Substanz entsprechen. Während die Oberflache der akrosomalen Region relativ glatt ist, zeigt die postakro‐somale Zone meistens submembranöse Unebenheiten: Sägezahnähnliche Furchen, Ein‐senkungen, regelmäßige Streifungen und caudalwarts gelegene parallel angeordnete Partikel der postakrosomalen Scheide und den hinteren Ring. Die rasterelektronmikro‐skopischen Befunde sind mit denen der Transmissionselektronenmikroskopie und der Gefrierätzung zu vergleichen. Die hier dargelegten relativ einfachen Praparationsmethoden erlauben sowohl eine Analyse der allgemeinen Morphologie von Spermatozoen als audi die Untersuchung der oberflachlichen Feinstruktur. Resumen Espermatozoides de conejo, obtenidos por ejaculación mediante vagina artificial, se prepararon para su observación con el microscopio electrónico de barrido. Luego de lavado, los espermatozoides se fijaron en glutaraldehido y luego, o se secaron al aire o trataron por el método del punto critico. Las dos técnicas permiten obtener resultados de interés sobre la estructura superficial (submembranosa) de los espermatozoides (secado al aire) o bien un aspecto probable‐mente mas representative del estado vivo (punto critico). La cabeza de los espermatozoides esta formada de dos partes, el acrosoma y la region post‐acrosomica. El acrosoma comprende el segmento anterior, limitado por un engrosa‐miento marginal en forma de herradura y el segmento ecuatorial, mas fino, en forma de media luna. Protuberancias de la substancia sub‐acrosomica sobresalen en el limite de estos dos segmentos del acrosoma. La superficie del acrosoma es relativamente lisa en tanto que en la región post‐acro‐sómica se transluce la estructura submembranosa del espermatozoide. Así son visibles: el borde anterior serrado, las perforaciones, las estriaciones regulares y particulas alinea‐das paralelamente de la lamina post‐acrosomica y el anillo posterior. De este modo es posible establecer una comparacion util con la microscopia de barrido y la de transmi‐sion (cortes finos y congelación‐fractura). Las técnicas utilizadas, relativamente simples, permiten a la vez analizar rapidamente la morfologia general de una muestra desconocida de espermatozoides y el detalle de la estructura fina de la superficie de éstos. Résumé Etude au microscope à balayage de spermatozoides de lapins Des spermatozoïdes éjaculés de Lapins ont été préparés pour l'observation au microscope à balayage. Après lavage, ils sont fixés dans le glutaraldéhyde et séchés à l'air ou à l'aide de la méethode du point critique (Fréon). Les deux techniques permettent d'obtenir des informations interessantes sur la structure superficielle (sous‐membranaire) des spermatozodes (séchage à l'air) ou un aspect plus proche de l'état vivant (point critique). La téte des spermatozoides est formee de deux parties, l'acrosome et la region post‐acrosomique. L'acrosome comprend le segment anterieur borde par un epaississement marginal en forme de fer a cheval et le segment equatorial. plus mince et en forme de demi‐lune. Des gonflements de la substance subacrosomique font saillie à la limite des deux segments acrosomiques. La surface de l'acrosome est relativement lisse, tandis que la région postacrosomique laisse transparatre la structure sous‐membranaire des spermatozodes. La bordure an‐térieure en dents de scie, les perforations, les striations régulières et les alignements paralleles de particules de la lame postacrosomique ainsi que l'anneau postérieur sont visibles. Ainsi, une comparaison utile est possible entre la microscopie à balayage et à transmission (coupes et cryodécapage). Les techniques utilisées, relativement simples, permettent à la fois d'analyser rapide‐ment la morphologie générale d'un échantillon inconnu de sperme et en détail la structure fine superficielle des spermatozodes.