The Detection and Preparative Separation of Anti‐A Hemagglutinins Following Starch Gel Zone Electrophoresis

Summary A method is presented for the detection and separation of minute quantities of both human and plant anti‐A hemagglutinins from starch gels following zone electrophoresis. Detection and localization of antibody by direct incubation of one millimeter sections of gel with A 1 cells were sucessfully carried out. Significant amounts of antibody‐containing liquid were obtained from the gel by cubing of selected sections into one millimeter pieces and allowing these to stand in the cold. Addition of small volumes of suitable solutions assisted in diluting and carrying the extruded material from the gel surface. Recoveries of hemagglutinin averaging 73% were obtained using crude immune anti‐A serum. Somewhat lower average recoveries were attained for crude P. lunatus extract (41%), partially purified immune anti‐A serum (58%) and partially purified P. lunatus (30%). Résumé Les auteurs présentent une méthode pour la détection et la séparation de petites quantités d'hémagglutinines anti‐A d'origine humaine et végétale à partir de blocs de gélose d'amidon après électrophorèse de zone. La détection et l'utilisation de l'anticorps, par incubation directe de fragments de 1 mm de gélose avec des érythrocytes A 1 est tout à fait satisfaisante. Des quantités significatives de liquide contenant l'anticorps ont été obtenues à partir de la gélose en la fractionnant par morceaux et en mettant ces morceaux au froid. En ajoutant de petites quantités de solution adéquate, on favorise l'extrusion du matériel à partir de la surface de gélose. Le taux de récupération de l'hémagglutinine est de 73% lorsqu'on utilise un sérum anti‐A immun brut. Le taux de récupèration est légèrement plus bas pour l'extrait de P. lunatus brut (41%), le sérum anti‐A immun partiellement purifié (58%) et l'extrait de P. lunatus partiellement purifié (30%). Zusammenfassung Es wird eine Methode zum Nachweis und zur Trennung geringster Mengen von menschlichen und pflanzlichen Anti‐A‐Hämagglutininen aus Stärkegelelektrophoresestreifen beschrieben. Der Nachweis und die Lokalisation erfolgte durch direkte Inkubation von ein Millimeter breiten Schnitten mit A 1 Zellen. Es gelang erhebliche Mengen antikörperhaltiger Flüssigkeit aus ausgewählten, ein Millimeter breiten und in der Kälte stehengelassenen Schnitten zu gewinnen. Der Zusatz kleiner Mengen geeigneter Lösungen erwies sich als brauchbar, um die Wirkstoffe von der Geloberfläche abzulösen. Bei Verwendung von rohem Anti‐A‐Immunserum betrug die Ausbeute an Hämagglutinin im Mittel 73%. Mit rohem P. lunatus ‐Extrakt war sie etwas geringer, sie betrug im Mittel 41%. Ebenso wurden bei Verwendung von teilweise gereinigtem Immun‐Anti‐A‐Serum und von teilweise gereinigtem P. lunatus ‐Extrakt niedere Ausbeuten festgestellt. Sie betrugen 58 bzw. 30%.