Premium
Optimal Conditions for Detecting Blood Group Antibodies by the Antiglobulin Test
Author(s) -
HUGHESJONES N. C.,
POLLEY M. J.,
TELFORD R.,
GARDNER B.,
KLEINSCHMIDT G.
Publication year - 1964
Publication title -
vox sanguinis
Language(s) - English
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.68
H-Index - 83
eISSN - 1423-0410
pISSN - 0042-9007
DOI - 10.1111/j.1423-0410.1964.tb03307.x
Subject(s) - antibody , titer , incubation , agglutination (biology) , antigen , microbiology and biotechnology , chemistry , blood group antigens , medicine , immunology , biochemistry , biology
Summary From the known effect of pH, temperature, antigen and salt concentration on the reaction between an example of anti‐D and red cells, it has been found possible to suggest optimum conditions for the detection of other antibodies by the antiglobulin test. By lowering the salt concentration of the suspending medium the rate of association of antibody and red cells is considerably increased, so that the incubation time can be reduced from 1 hour to 5 minutes. Performance of the antiglobulin test under these conditions has been found to enhance the titre of antibodies against the following antigens: A, c. D, e, E, M, K, Le a , Fy a , Jk a . Using 131 I‐labelled anti‐D it was estimated that approximately 500 molecules of blood group antibody on the surface of each red cell would give a just detectable agglutination reaction with antiglobulin serum under standard conditions. Résumé Connaissant l'effet du pH, de la température, de la concentration en antigène et en sel sur la réaction entre l'anti‐D et les érythrocytes, il nous a semblé possible de trouver les conditions optimales permettant de détecter d'autres anticorps au moyen du test à l'anti‐globuline. En diminuant la concentration en sel du milieu de suspension, le taux d'association de l'anticorps avec les érythrocytes est considérablement augmenté, si bien que le temps d'incubation peut être réduit de 60 minutes à 5 minutes. La pratique du test à l'anti‐globuline dans ces conditions a démontré une augmentation du titre de l'anticorps contre les antigènes suivants: A, c, D, e, E, M, K, Le a , Duffy a , Jk a . Lorsqu'on utilise de l'anti‐D marqué au 131 I, on a pu estimer que, approximativement, 500 molécules d'anticorps de groupe sanguin fixés à Ia surface de chaque érythrocyte donnent une réaction d'agglutination aisément décelable avec le scrum anti‐globuline dans des conditions standard. Zusammenfassung Anhand der bekannten Beeinflussung der Reaktion eines Anti‐D‐Antikürpers mit Erythrozyten durch das pH, die Temperatur, die Antigen‐ und Salzkonzentration wurden die optimalen Bedingungen für den Nachweis anderer Antikürper mittels des Antiglobulintestes ermittelt. Durch Herabsetzung der Salzkonzentration der Aufschwemmungsflüssigkeit gelang es die Geschwindigkeit der Antikürperbindung an die Erythrozyten derart zu beschleunigen, daß die Inkubationszeit von 1 Stunde auf 5 Minuten herabgesetzt werden konnte. Bei Innehaltung dieser Bedingungen gelang es im Antiglobulintest den Titer der Antikürper gegen folgende Antigene zu erhühen: A, c, D, e, E, M, K, Le a , Fy a , Jk a . Mittels 131 I‐markierten Anti‐D‐Antikürpern gelang es zu zeigen, daß unter Standardbedingungen 500 Antikürpermoleküle pro Erythrozyt eben ausreichen, um im Antiglobulintest eine positive Agglutination auszulüsen.