Complement Fixation‐Mixed Agglutination Test in Cell Cultures 1

Summary A mixed agglutination technique for detecting fixation of complement by antigen‐antibody complexes was described. Monolayer cell cultures were incubated with their corresponding antisera and guinea pig complement. The indicator system to detect binding of complement was composed of tanned sheep red blood cells that were coated by guinea pig serum and agglutinated by rabbit antiserum against guinea pig serum. Antiserum titers obtained by this procedure were lower than the titers obtained in mixed agglutination procedure detecting the attachment of antibodies. They were, however, usually higher than the titers observed in the cytotoxicity and metabolic inhibition tests. Résumé Une technique d'agglutination mixte destinée à la détection de la fixation du complément sur les complexes antigène‐anticorps est décrite. Des cultures de tissues en couche monocellulaire sont incubées avec les anti‐sérums correspondants et du complément de cobaye. Le système indicateur pour la détection du complément est composé d'érythrocytes de mouton traités par l'acide tannique, revêtus de sérum de cobaye et agglutinés par un sérum de lapin anti‐sérum de cobaye. Les titres d'anti‐sérum obtenus par cette méthode sont plus bas que les titres obtenus dans la technique d'agglutination mixte qui met en évidence la fixation des anticorps. Toutefois, ils étaient d'ordinaire plus hauts que les titres observés dans les tests de cytotoxicité et d'inhibition métabolique. Zusammenfassung Es wird eine Mischzellagglutinationstechnik zum Nachweis der Komplementbindung an Antigen‐Antikürperkomplexe beschrieben. Zellkulturen wurden mit den entsprechenden Antiseren und Meerschweinchenkomplement inkubiert. Das zum Nachweis der Komplementbindung benützte Indikatorsystem bestand aus tannierten, mit Meerschweinchenserum behandelten Hammelerythrozyten, die mit Anti‐Meerschweinchenserum vom Kaninchen agglutiniert worden waren. Die mit diesem Verfahren erhaltenen Titerwerte waren niedriger als jene, die mit Mischzellagglutinationstechniken erzielt wurden, bei welchen der an der Zelloberfläche gebundene Antikürper nachgewiesen wird. Immerhin waren sie im allgemeinen hüher als die Titer, die bei Zytotoxizitätstests und Stoffwechselhemmversuchen zur Be‐obachtung gelangten.