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Détection du mildiou du pois ( Peronospora viciae ) par méthode immunoenzymatique (ELISA) dans les lots de semences 1
Author(s) -
CORBIÈRE R.,
MOLINERO V.,
LEFÈBVRE A.,
SPIRE D.
Publication year - 1995
Publication title -
eppo bulletin
Language(s) - French
Resource type - Journals
SCImago Journal Rank - 0.327
H-Index - 36
eISSN - 1365-2338
pISSN - 0250-8052
DOI - 10.1111/j.1365-2338.1995.tb01437.x
Subject(s) - microbiology and biotechnology , physics , biology , chemistry , horticulture
Un sérum polyclonal a été produit en utilisant les conidiophores broyés de Peronospora viciae comme immunogène. Deux méthodes ELISA ont été comparées: une méthode indirecte (ACP‐ELISA) et une méthode sandwich révélée avec un système d'amplification à la biotinestreptavidine (DAS‐ELISA‐biotine). En DAS‐ELISA‐biotine, le champignon mélangéà des graines saines était mieux révélé qu'en ACP‐ELISA; 2,5ng de protéines de P. viciae par ml pouvaient alors être détectés. Les principaux agents pathogènes et saprophytes des graines de pois (13 genres testés) n'étaient pas reconnus en DAS‐ELISA‐biotine. Cette méthode a été appliquée à l'analyse de lots de graines. Pour chaque lot, 32 groupes de 30 graines ont été prélevés et le tampon de lavage des graines a été analysé après une nuit de macération des graines, sous agitation. Des graines individuelles ont également été testées. La majorité des lots analysés présentaient un faible degré d'infection (de 2,5 à 10 ng de protéines fongiques par ml). De plus, le degré d'infection des graines individuelles était très hétérogène au sein d'un lot. Cette méthode ELISA s'est avérée plus fiable que la méthode traditionnelle (observation microscopique des oospores dans l'eau de lavage des graines) employée actuellement pour détecter le mildiou dans les lots de graines.