Mikrobielle Werkstoffzerstörung – Biofilm und Biofouling: Quantifizierung atmungsaktiver Bakterien in Wasser und in Biofilmen mit einem fluoreszierenden Redox‐Farbstoff

Abstract Immer wieder taucht bei der Bearbeitung mikrobieller Probleme die Frage auf, ob die Mikroorganismen physiologisch aktiv sind oder nicht. Es wird eine Methode vorgestellt, die eine direkte Quantifizierung atmungsaktiver Bakterien in Wasser‐ und Biofilmproben zuläßt. Die Bestimmung wird mit einem fluoreszierenden Redoxfarbstoff (5‐Cyano‐2,3‐Ditolyltetrazoliumchlorid [CTC]) durchgeführt. Durch die Fluoreszenz ist ein empfindlicher Nachweis sowohl im Wasser als auch auf undurchsichtigen Oberflächen möglich. Die Biomasse‐Aktivität kann summarisch bestimmt werden, es läßt sich aber auch die Aktivität einzelner Zellen über die Lichtausbeute mikroskopisch feststellen, denn bei der Reaktion entsteht ein sehr gut detektierbarer fluoreszierender Formazan‐Kristall. Das Verfahren ist einfach und in kurzer Zeit (1–2 h) durchzuführen. Es liefert die Anzahl physiologisch aktiver Zellen und kann mit Färbemethoden zur Ermittlung der Gesamtzellzahl kombiniert werden. Der CTC‐Test bietet sich damit für Routineuntersuchungen und für die Eigenkontrolle an, nicht zuletzt, um die Wirksamkeit von keimtötenden Maßnahmen zu überprüfen.