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Ein neuer Aufbau zur Untersuchung der Struktur und Funktion von solvatisierten, lyophilisierten und kristallinen Metalloenzymen – veranschaulicht anhand von [NiFe]‐Hydrogenasen
Author(s) -
Lorent Christian,
Pelmenschikov Vladimir,
Frielingsdorf Stefan,
Schoknecht Janna,
Caserta Giorgio,
Yoda Yoshitaka,
Wang Hongxin,
Tamasaku Kenji,
Lenz Oliver,
Cramer Stephen P.,
Horch Marius,
Lauterbach Lars,
Zebger Ingo
Publication year - 2021
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/ange.202100451
Subject(s) - chemistry
Abstract Zur Untersuchung von Metalloenzymen haben wir einen Aufbau für die Präparation katalytischer Intermediate und deren anschließende Charakterisierung mit spektroskopischen Techniken entwickelt. Mit diesem können Redoxreaktionen in Enzymen in Form von Lyophilisat, gelöst oder als Kristall in einem großen Temperaturbereich IR‐spektroskopisch in situ verfolgt werden. Zwei sauerstofftolerante [NiFe]‐Hydrogenasen wurden als Modellenzyme untersucht. Zunächst wurde der Aufbau zur Herstellung von komprimiertem Lyophilisat einer Hydrogenase in einem paramagnetischen Zustand mit verbrückendem Hydrid genutzt. Dies erleichterte die Charakterisierung durch 57 Fe‐kernresonante inelastische Streuung und erlaubte es, in Kombination mit DFT, die schwingungsspektroskopischen Merkmale dieses katalytischen Intermediats zu detektieren. Der In‐situ‐IR‐Aufbau lieferte zusammen mit Resonanz‐Raman‐Untersuchungen auch Einblicke in die Redoxchemie von Proteinkristallen. Eine Ergänzung röntgenkristallographischer Daten durch komplementäre spektroskopische Analysen ist daher essentiell.