Premium
Die gerichtete Evolution einer Halogenid‐Methyltransferase erlaubt die biokatalytische Synthese diverser SAM‐Analoga
Author(s) -
Tang Qingyun,
Grathwol Christoph W.,
AslanÜzel Aşkın S.,
Wu Shuke,
Link Andreas,
Pavlidis Ioannis V.,
Badenhorst Christoffel P. S.,
Bornscheuer Uwe T.
Publication year - 2021
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/ange.202013871
Subject(s) - chemistry , stereochemistry
Biokatalytische Alkylierungen sind wichtige Reaktionen, um chemo‐, regio‐ und stereoselektiv alkylierte Verbindungen zu erhalten. Dies kann mit S‐Adenosyl‐ l ‐methionin (SAM)‐abhängigen Methyltransferasen und SAM‐Analoga erreicht werden. Kürzlich wurde gezeigt, dass eine Halogenid‐Methyltransferase (HMT) aus Chloracidobacterium thermophilum SAM ausgehend von SAH und Methyliodid herstellen kann. Wir entwickelten einen Iodid‐basierten Assay für die gerichtete Evolution einer HMT aus Arabidopsis thaliana und nutzten diesen, um eine V140T‐Variante zu identifizieren, die auch Ethyl‐, Propyl‐, und Allyliodid akzeptiert, um die entsprechenden SAM‐Analoga herzustellen (90, 50 und 70 % Umsatz ausgehend von 15 mg SAH). Die V140T‐AtHMT wurde in einer Eintopfkaskade mit O ‐Methyltransferasen (IeOMT und COMT) eingesetzt, um die regioselektive Alkylierung von Luteolin und 3,4‐Dihydroxybenzaldehyd zu erzielen. Obwohl eine Kaskade zur Propylierung von 3,4‐Dihydroxybenzaldehyd niedrige Umsätze ergab, konnte das Propyl‐SAH‐Intermediat durch NMR‐Spektroskopie bestätigt werden.