Premium
“Molecular Activity Painting”: schaltbare, lichtgesteuerte Manipulation in lebenden Zellen
Author(s) -
Chen Xi,
Venkatachalapathy Muthukumaran,
Kamps Dominic,
Weigel Simone,
Kumar Ravi,
Orlich Michael,
Garrecht Ruben,
Hirtz Michael,
Niemeyer Christof M.,
Wu YaoWen,
Dehmelt Leif
Publication year - 2017
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/ange.201611432
Subject(s) - chemistry , microbiology and biotechnology , biology
Die akute subzelluläre Rekrutierung von Proteinen ist eine leistungsfähige Methode zur Untersuchung biologischer Netzwerke. Hoch‐dynamische Signalprozesse an der Plasmamembran können bisher jedoch nur bedingt räumlich und zeitlich untersucht werden. Insbesondere durch laterale Diffusion an der Plasmamembran ist eine anhaltende lokale Steuerung molekularer Funktionen schwer zu realisieren. Hier wird die “Molekulare‐Aktivitäts‐Malerei” (Molecular Activity Painting, MAP) vorgestellt, eine neuartige Technik, die photoaktivierbare chemisch induzierte Dimerisierung (pCID) mit immobilisierten künstlichen Rezeptoren kombiniert. Die Immobilisierung der künstlichen Rezeptoren durch oberflächengebundene Antikörper hemmt die laterale Diffusion. Hierdurch wird schnelles und stabiles Malen (Painting) von Signalmolekülen und deren Aktivität an der Plasmamembran im Mikrometermaßstab ermöglicht. Stabiles Malen des RhoA‐Myosin‐Aktivators GEF‐H1 kann kontraktile Actomyosin‐Strukturen in lebenden Zellen induzieren.