Eine biokatalytische Kaskade für die vielseitige Eintopf‐Modifizierung von mRNA ausgehend von Methioninanaloga

Methyltransferasen sind nützlich, um funktionelle Gruppen ortsspezifisch in Biomoleküle einzubauen, wenn Analoga des Kosubstrates S‐Adenosyl‐ l ‐Methionin (AdoMet) verfügbar sind. Methyltransferasen wurden eingesetzt, um RNA‐Moleküle selektiv und ortsspezifisch zu adressieren, was für biophysikalische und mechanistische Studien sowie die Markierung in der komplexen zellulären Umgebung unerlässlich ist. AdoMet‐Analoga sind jedoch nicht zellgängig, sodass diese Strategie nicht in Zellen anwendbar ist. Wir präsentieren eine zweistufige enzymatische Kaskade zur ortsspezifischen mRNA‐Modifizierung ausgehend von Methioninanaloga. Unser Ansatz kombiniert die enzymatische Synthese von AdoMet mit der Modifikation der 5′‐Kappe durch eine spezifische mRNA‐Methyltransferase in einem Eintopfverfahren. Wir zeigen, dass eine Reihe von Substraten, unter anderem mit Alken‐, Alkin‐ und Azidoresten, eingesetzt werden kann und dass die weitere Derivatisierung mit Klick‐Reaktionen gelingt.