Proteasesonden, die Spaltung durch Excimeremission anzeigen

Peptidbasierte Sonden, die nach einer proteolytischen Spaltung fluoreszieren, sind unschätzbare Hilfsmittel für Untersuchungen von Proteaseaktivitäten. Eine Signalerzeugung durch Pyrenexcimere ist vorteilhaft, da die große Stokes‐Verschiebung und die lange Lebensdauer der Excimeremission Messungen in autofluoreszierenden Medien wie Blutserum erleichtern. Die proteolytische Spaltung stört jedoch die Proximitätsbeziehungen, die für eine excimerbasierte Signalgebung notwendig sind. Wir stellen eine neue Sondenarchitektur vor, bei der die Pyrenexcimeremission durch Spaltung eingeschaltet wird. Die Methode beruht auf haarnadelförmigen Peptidnukleinsäure(PNA)‐Peptid‐Hybriden. Im PNA‐Stamm werden Pyreneinheiten und Anthrachinonlöscher reißverschlussartig positioniert. Die Excimer Hairpin Peptide Beacons erbringen eine bis zu 50‐fache Verstärkung der Pyrenexcimeremission. Zeitaufgelöste Messungen ermöglichen die Detektion der Matrixmetalloprotease 7 im humanen Blutserum.