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Hochaufgelöste Visualisierung des Golgi‐Apparats in lebenden Zellen mit einem bioorthogonalen Ceramid
Author(s) -
Erdmann Roman S.,
Takakura Hideo,
Thompson Alexander D.,
RiveraMolina Felix,
Allgeyer Edward S.,
Bewersdorf Joerg,
Toomre Derek,
Schepartz Alanna
Publication year - 2014
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/ange.201403349
Subject(s) - chemistry , golgi apparatus , microbiology and biotechnology , biology , endoplasmic reticulum , biochemistry
Wir berichten über eine Lipid‐basierte Strategie zur Visualisierung von Struktur und Dynamik des Golgi‐Apparats in lebenden Zellen mithilfe hochauflösender Mikroskopie. Die Methode basiert auf zwei neuen Reagentien: einem trans ‐Cycloocten enthaltenden Ceramid‐Lipid (Cer‐TCO) und einem hoch reaktiven, Tetrazin‐markierten Nah‐IR‐Farbstoff (SiR‐Tz). Diese beiden Komponenten reagieren in einer extrem schnellen Tetrazin‐Klick‐Reaktion zu Cer‐SiR, einer sehr photostabilen Verbindung, welche die Visualisierung des Golgi‐Apparats sowohl mit 3D‐Konfokalmikroskopie als auch mit hochauflösender Mikroskopie über eine längere Zeitspanne ermöglicht. Cer‐SiR ist nicht toxisch bis zu einer Konzentration von 2 μ M und stört weder die Mobilität von Enzymen innerhalb des Golgi‐Apparats noch den Transport von Fracht vom Endoplasmatischen Retikulum durch den Golgi‐Apparat zur Plasmamembran.