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Transient and Switchable (Triethylsilyl)ethynyl Protection of DNA against Cleavage by Restriction Endonucleases
Author(s) -
Kielkowski Pavel,
MacíčkováCahová Hana,
Pohl Radek,
Hocek Michal
Publication year - 2011
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/ange.201102898
Subject(s) - primer (cosmetics) , dna , polymerase , dna polymerase , chemistry , restriction enzyme , cleavage (geology) , computer science , stereochemistry , microbiology and biotechnology , biology , biochemistry , organic chemistry , paleontology , fracture (geology)
Eingeschränkter Zugang zu DNA : (Triethylsilyl)ethinyl‐modifiziertes 7‐desaza‐dATP kann durch Primer‐Verlängerung oder Polymerase‐Kettenreaktion mit KOD XL‐Polymerase in DNA eingebaut werden. Die Silylethinyl‐geschützte DNA ist gegenüber der Spaltung durch Restriktionsendonukleasen (REs) wie RsaI stabil (siehe Abbildung). Erst nach der Umsetzung mit NH 3 kann die daraufhin ungeschützte DNA durch REs gespalten werden.