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Cyclic Luciferase for Real‐Time Sensing of Caspase‐3 Activities in Living Mammals
Author(s) -
Kanno Akira,
Yamanaka Yuko,
Hirano Hisashi,
Umezawa Yoshio,
Ozawa Takeaki
Publication year - 2007
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/ange.200700538
Subject(s) - luciferase , chemistry , microbiology and biotechnology , caspase , caspase 3 , apoptosis , caspase 2 , biochemistry , biology , programmed cell death , gene , transfection
Erhellendes zur Apoptose : Leuchtkäfer‐Luciferase wurde mit der Caspase‐3‐Substratsequenz DEVD verknüpft und durch ein Intein DnaE cyclisiert. Nach der Expression in lebenden Zellen ist die Aktivität dieser cyclischen Luciferase aus sterischen Gründen stark verringert. Aktivierte Caspase‐3 spaltet die Substratsequenz und stellt so die Luciferase‐Aktivität wieder her. Der zeitliche Verlauf der Caspase‐3‐Aktivität nach einem extrazellulären Reiz konnte in lebenden Zellen und Mäusen quantitativ verfolgt werden (siehe Bild).