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Direkte Identifizierung von Proteinkatalysatoren mit Phosphatase‐Aktivität durch kovalente Bindung an ein Suizid‐Substrat
Author(s) -
Betley Jason R.,
CesaroTadic Sandro,
Mekhalfia Abdelaziz,
Rickard James H.,
Denham Hazel,
Partridge Lynda J.,
Plückthun Andreas,
Blackburn G. Michael
Publication year - 2002
Publication title -
angewandte chemie
Language(s) - German
Resource type - Journals
eISSN - 1521-3757
pISSN - 0044-8249
DOI - 10.1002/1521-3757(20020301)114:5<801::aid-ange801>3.0.co;2-z
Subject(s) - chemistry , stereochemistry
Über einen Disulfidaustausch wird der Phosphatester 1 an eine feste Oberfläche gekuppelt. Anschließend können aus einer großen Bibliothek Proteine mit Phosphatmonoesterhydrolyse‐Aktivität selektiert werden, wobei der Selektionsdruck auf einen effizienten katalytischen Umsatz gerichtet ist. Die Hydrolyse des Esters führt zur Bildung eines elektrophilen Chinonmethids 2 , das kovalent an das katalytische Protein bindet und es an die Oberfläche kuppelt.