The effects of capparis spinosa ethanol extracts on humoral immune responses in mice treated with aflatoxin B1

The results of this investigation had demonstrated the production of aflatoxins from Aspergillus flavus and study effects on humoral immune by measuring the concentrations of immunoglobulins IgA, IgG, IgM, IgE and measurement of concentrations of the complements C3, C4 in mice with treated of Aflatoxin B1. The results of qualities analysis HPLC showed the ability of isolation of Aspergillus flavus from chips, macroni, red sun flower, shamia, hazelnut, corn and peanut and isolate from fish to produce aflatoxin with different rate. The isolation of Aspergillus flavus which isolated from peanuts recoded the highest rate of production of aflatoxin B1 which it reached to (213760.28) ppm. 40 male mice were used experimentation they divided into eight groups. Three groups of mice were gave aflatoxin B1 56.3 ppm and after 2 hours treated by ethanolic extracts crude phenol and alkaloid in 250 mg/ ml while the fourth group was given aflatoxin B1 only, while the fifth, sixth and seventh groups were treated with ethanolic extracts only and the eight group was given control groups PBS. The results of study showed a significant increase in concentrations immunoglobulins IgA, IgG, IgM in the mice that dosage of extracts crude after gave aflatoxin B1 56.3 ppm it reached the highest concentration of IgA, IgG, IgM (139. 06, 3223.80, 339.66) mg/ 100 ml respectively compared with positive control that gave aflatoxin only it reached IgA, IgG, IgM (20. 23, 108.66, 25.30) mg/ 100 ml respectively. The results of the study also recoded a significant increase in the IgE concentration of 22 IU in mice that gave the crude extract after giving aflatoxin B1 with concentrations of 56.3 ppm compared to positive control of 2.83 IU. The results of the study showed a significant increase in concentration of complements C3, C4 in mice that dosage ethanolic extracts crude phenols and alkaloid after two hours gave aflatoxin B1. The highest concentration of C3, C4 (279.33, 132.20) mg/ 100 ml respectively in mice that gave crude extract after given aflatoxin B1 in compared with positive control that gave aflatoxin B1 only it reached concentrations C3, C4 (12, 17.50) mg/ 100 ml respectively. We concluded of that caper plant has immune stimulatory effects in mice. Keyword: ethanol extracts, capparis spinose, immune responses, mice, aflatoxin B1 ةمدقملا هادلا ةهكددلاهس د هاد سف ةهل د ةهند ه د ةد ه ة د هلاهاد لار ةهم د ة هذسد لار سسهر دعشة هاد ر شةهك ددلاهلدث ددةلا ه، دد و ةهنزددخ ةهر لددظه دد هلددقلارلا ه ه ة ددوهلدد س ه دددقهل ددئ (1) (هذ سددئ ةهلددلاسق ةهاداددئ ه ددداأ ه، Silent killers ه دددة ه.ل ددد ا ةهنددد ه ة دددفأ هناسدددسد ةهادددههم ددد لا ةهذ سددد هاددد لار ةهم ددد ةهوسددد لا ه.اددد لار ةهم ددد ةه ددددعه) دث ةهلد شةهذسدس ل هادههذسف د لا ه ة ه،اد ر شةهك د لا هاسسد ةها لار ةهم ةه ة فأهلث أهن هن لا هشة ه فس Secondary metabolic ه ( 2 ه، 3 ه.) هن لددار ةهندد هتلاددف ه دده Aspergillus parasiticus ه و Aspergillus flavus ه:اده هن د لا ه ةهند ه ة فأهاةسلأه و لا ه. AFG2, AFG1, AFB2, AFB1 ه هند ه د هتلادفلا AFB2, AFB1 ه هلار ةهااس س A. flavus ه ه ة دفشةهتلادفلاهن د هاه AFG2, AFG1 ه هن لدار ةه د هند A. parasiticus, A. flavus هن د لا ه ةهاد ازوه دةلا ه. B1 ه هنسالد ة هكد سد هاد د ةهاد س ةهذرفدئه دق ه، ة دوهاد سعها د هذةر ( دمجملا ،ةيرطيبلا مومعمل رابنلأا ةمجم 11 ( ددعلا ،) 2 ،) 2018 ISSN:1999-6527 39 IARC ه هن د لا هة B1 ه دس ةهنسالد هكة د هادههل شة ه ( 4 ه، 5 ه، 6 ) ه. هن د لا ه سسهم د لاد ه لدخشةهذة ل ثأدلا ةهند دعه،م ود هاعسف ةهزسهو ةهراسظ هرسةض هاههن ز ة هاد اسلا ةهاد سر د ةهسد خ ةهاد سةههلة زدلاخةه د لاهن T-cell ه ه أ ها عسف ةهذسف س د ف ةهلسرخفةهوس س IgA, IgG, IgM ه هذسد لا ةهلسرخفة هل ا ةهاه Complements ه هاده هيسو ة (7) . ه ن د لا ه ةهنتدههةردهس هن د لا ه سسهاسسدئلإةه سد زسه سسدد هلثأدلالاهاعسف ةهزسهو ةهراسظ هنسههك رس ه B1 ه هم ثة لددو ة هلة ل شسددسهاسسددئث هاددضلعهلددث أه ة لددهشةهلددةو ها سددلا سس هادد ادخ ة هادد دخ ةهادد عسف ةهاسسولادد ةهاسددث هذسددد د را ة (8) . ه هاددددو سة ه أهءل هاددددههلدددس ةهذسددددئدخلا هاددد سةههنددددعه لددد لا ةهاددددههاددد د ة ةها هسدددد ةهلدددوأهندددد هن لا ه ة B1 ه نس ه هها ة ل ةهر ه ه سف س د ةهز ة للاهرس ق ها عسف ةهذ IgM, IgG, IgA, IgE هرس قهك ر ه. هذس لا ةهز ة للا C3, C4 . ه لمعلا قئا رطو داوملا هم خلا ة 40 ه هادههذةدض هر هن لدهف ةهادة سوه/ودا ةهاد د هيسسدلا ةهافة د ةهذد س ةهند هل دس ةهنة لدار ةهل د رهند سد ة همسدةا سسهذسدفة ةهذزدهو ه لسدشف سسهذدشلههبسدرقأهلسدسفشةهادة سوه/م دة ةها د ه سد ه لسدشف ةهلد غلاهيد ه سد هء هلددد ةسهذدددفس 5 ه 6 ه (هنز دددس هي سسددد أ 20 ه 35 هم ددد هي سدددو هك دددثهذددد اعأهي سدددو هاددد فس ثه ددد هذ ددد قه.مددد ه) هن دد لا ه ة B1 ه هزددد للاس 56.3 ه هذ دددف ر ة همسدددخ ةهادد فسث ةهذسدددئدخلا ةهذدد اعأهن لاعسددد ه ددةس هن د سدددسهءزددو هزدد للاسهذة د دق ة 250 ه دد اعأ هلدد ه/مددغد هن دد لا ه ةهم دد هاددقههادةسة ل ةهاددع و ةهذ B1 ه هك ثدد ةهي سددو ةهسدد أ هل دددد ةهذددد اعأه لددد خشةهادددع و ةهسددد أهادددسو ه لا ددد هذلدددسلاعة هاددد فسث ةهذسدددئدخلا ةهادددقههذددد اعأه لدددخشة .اد د ة هنة لدار ةهم ه ددعهلدئ ادقفة ةه د ل ةهيداقهااد ة س ه هاد قة هود سسفأهادههم د ةهيدض يفسد ه سد ه ددعهاد س ه هن لسدددس ه ةهادولاددد ة هاعلددد سهردددسفهمدددث 2000 ه ه ددد هادددق ق ه/ ل 10 ه هوددد سسفأهادددههيدددض هلدددئ ةهو ددد هسه دددةس ه اسدددق ه لة ل هاول هاههيض ها قة هر ل فسة 20 ه .لس ةلا ةهن همْ هذة و 10 ه هاده هاردلاخ ها اةر هل سئ هن ه ة هاف ل ة ة ها سش ة هافة ل لإةهساساس ةهااة لش هاقة لة ةهساساس ةهااة لش هافة د ةهل در ة ه لرد ة ه دفس ة هلد شةهو ة هنز س ه س هل هذسف عهك ثهيقة س هك ةهن ها زع هر ش ةهلة 150 ه هلداههذ زدعه ددعهل دئ ةهللغ هم Aspergillus flavus ه هن لا ه هتلاف ة ( 9 .) دقف ذ ه س ةهم دعهم قهاههذس لار ةهلسلاخ ه ها اةرغ ةه ة ةهذسف ع ه دة ةها د هذدةاق هلسدسفشةهادة سوه/م ه ل غئهياقه 5 ه ئ ةهذة ل د س سههل د سه س ا هذ قع همد هز للاسهم 2 .ن دلاق ق ه د ه% ه هءسد سسهسهدد همدلا ةه ة ل أه دعهذةض همثه،مقة ةهلاق ة ه هءس ةهن هبدخلاد ها شللا هسدهلاقها لا سه سساأهاههسهعلز 8 ه ه د لاهمد ها SDA ه ةهن هياقهيسلأهيض سهك ر ه ةسه دعها اةرغ ةه س 3 ه هاد هادههاد سخهادةاق هرد ا ةهادهس هندعهمد ه لة ل هاول هذ لاه سساشةهذفض همثها اةر ه س هل ه)ذة لل (هذة ل هك ثها د ة ةهذلل ه سا ة 25 ه ± ه 2 ه ه د اهه ل ر ةهاق لا ةهو س ه س أ ه ( 10 ه، 11 .) ه د د ها سدلالا ةهلدقف ةهادق لاه سدسلاسسها لار ةهذ زة ةهذ قفهمث هذة ل ةلا هادددق لا ةهوددد سهاددد لهو ة هاددد لهظ ةهسهلاسردددئه ددددعه ة سددد لاعةهذدددئخشهسه دددةسههددد رفهادددعلز ةهاددد ةه ددددعهاددد لار ة اهه ل ر ة ه ( 12 .) ه رطف تلازع ةردق نع فشكلا A. flavus لافلاا جاتنإ ىمع اينوملأا لومحم مادختساب نيسكوت هندعهرش ةهملا هلاههذ زعه ل ق A. flavus ه اهه ل هس هو س ه ( 13 ) . ةييرطفلا فرا زيملا رييضحت هزلشةهند هن د ةهادة سا ةهاد ةهل ةلاد ة 50 ه ههد ه سهسدض همد 25 ه هءسد ةهند هلد ههلاة ه ل هاههلاق ة 250 ه ه لة ل هاول سها ةهةرههمقع هل 121 ه ه همْ 20 ه ه ةسه ئ ةهزسهوهاههاق ق دهوسلاف هادهلة هاد ةهةرهه دعها قف ةهلار ةهذ زعهن ها زعهل هذعلزهك ر هلد هلد ع هن د لا ه ةهم د هس ها زع 3 ه ه لة ل هاول هاهها لار ةه لة ز ةهذفض همثهذة لل 28 ه ه همْ 17 ه . س ( دمجملا ،ةيرطيبلا مومعمل رابنلأا ةمجم 11 ( ددعلا ،) 2 ،) 2018 ISSN:1999-6527 40 نيييسكوتلافلاا جاييتنإ ةفعاييضم B1 هلددسقهندد ه لة دد ةهاددق لا ةهذد ةلادد ة ( 14 ) ه، هن دد لا ه ةهرسدد قهمددلا B1 ه هزسهوهاا ة س HPLC . فرا زيييملا نيييم نييييسكوتلافلاا فلاختيييسا ةييييرطفلا ددد ة (هادددهه ل رددد ةهادددق لا ةهذد ةلا 15 ه) ه هندددعهردددش ةهمدددلا هزسهوهااس سهن لا ه ة HPLC . زاي ج ةطايسوب نييسكوتلافلاا نيع فيشكلا HPLC ه هم ددة ةه لة ز هذة لدسلاخ هادههن د لا ه ةهندعهردش ةهمدلا هزسهوهمة خلا سسهس و ف لا ة HPLC ه ه فهزسهوهاق لا ةهارههاههذد ةلا ة Shimadzu Lc-2010 AHT . لا عمج هفينصتو تابن هند ه ة دغسهادة سوه/ادعة لز ةهاد د ه اة د هود ل ه دسأهاقاف هن ه سوزساهلس ةهذسسفهي و هافد هيد سلا ةهلهدش ة هر سدخ ةهلهدش ةهادهه لسدضهنسدخهادقاف 2016 هرسدسعهاف د ه ل لا د ةهلدسقهند هرفدئ ه، ةهم دددةد هادد سللا ةهادد د ه دد هنسدد ثعه دد هل لا دد ة ه ة ددغسهاددة سوه/م دددة ةهادد د ه د دع .لسددسفشةهاددة سوه/اهلددئ ذدددقف ه خ ه دد هلددس ةهذسددسفه ة ل أهذسددف ع ذددد ه،لسددسفشةهاددة سوه/م دددة ةهادد د هلددسلا ه سسه دد وهل ددشس هءسدد ةهمة خلادد ه ه سددة ة دد هلاه ر هلددشسس ةهء ددض ةهنددعه دد ةسهنسدد هاددهه ة ل أه دددعهذلددشفه،لدداق ةهءسدد ة هودد دقلا ةهيدد ه دد وها ه.ل لادد ة هاددههذدداسع هادد اسسله هاددف ا سه ة ل شةهذددف ا هنسدد هاددههذددظر همدد ه ة دد هذةر هادد قة هذسدد س ةسه لسس ه لشسس ةهء ض ةهنع . رييبكلا تايبن تايصمختسم رييضحت هودد هلدس ةهذسدسف ه) د دق ةه،ا دف ر ةه،مسدخ ة(هذسدئدخلا ةهل دض لاهمدلا (هاهه ل ر ةه اة لا ة 16 .) .ةداضملا ماسجلأا فحف ييعانملا تاينيلويبومكلا داديضا ضوتيسمل ييمكلا ريديقتلا ة ( IgA, IgM, IgG, IgE لدس ه) ممتيملا مايان تاينيتو (C3, C4) لييصملا يييف هاددق لاهلس ةلادد سس Single Radial Immuno Diffusion ه هاعسددف ةهلسددشلاف ة ها لشهن ه زهو ةه ة ةهلس ةلا ةهملاهر ه،م ه ةهاهه لر ةهاعسةش ة LTA ه ها سا لإة ها لدش ةهذس دةلاه ه ه دع . زهو ة ا ماسجلأا زيكا رت سايق ةداضمل : IgE ه هزسدهوهل ةلاد ة Cobase 411 ه ها لدشهند Roch ه هلد ة ه رد ة هاد فس شة ها فقلاس Electrochemiluminescence (ECL) ه ها شسس Automation (هيض هل خهن ه. 10 ه) ه ةسهتاسلاف ةهلهظلا هزسهو ةهاههلئ ةهن هللا ل س 45 ه .اق ق يئاصحلإا ليمحتلا ةلا ة (هل س ةهااة شة ةهم ئلا ةهل CRD ) ه هذسفس سهل د لاه لو س هت سفلسهو ااسدئ لإة ه (هزهسو ة 2010,SAS ه) ( 17 ه) د ةه دةلا هند ف هلسدسلاخةهلس ةلاد سسهاردئهلد هذ سدة ةهذساد لا هذفل ق ه Duncan ه ( 1955 ه) ( 18 ه) .ذسا لا هن سه لهها فة ه لا ه جئاتنلا ةشقانملاو سفلاف سمجربسا رطف فيخشتو لزع Aspergillus flavus . افصلا ةيعرزملا ت هلار ةهب خشلاهملا Aspergillus flavus ه هذة ل ةلاد هل هظسها علز ةهذسرئ ةهل خهن هلسد ه لسسد هاد ةه ددعهذد فها عسةدشهءة لدضخ Sabrourd agar ه هل لد ه دةسه دسا ةهادهس ه د ه د ف ةهلدئ ه لة لد سهسهفدض هند ه س أ 28 ه هل دش(هلدضخأهن ددسه دساد ه ددة ةهااد ةهلدهظ هر همْ 1 اد ةهسد أ ه،) هادرد ةها هل ش(هلرئأهن دسهنس هه) سا ةهو دق ( 2 .) ( دمجملا ،ةيرطيبلا مومعمل رابنلأا ةمجم 11 ( ددعلا ،) 2 ،) 2018 ISSN:1999-6527 41 ه ( لكش 1 رطف ومن ) A. flavus ديورباس طسو يف SDA ةرا رح ةجردب 25 )رضخلأا نومب ر اي( فوبسا ةدمل مْ ه ( لكش 2 يبهذ نومب ر ات قبطلا بومقم ) ةير جملا تافصلا Microscopic characteristics ذغسدئ هااة لدش ةهند ه ة ةهل ض لاهملا ه هل دف ه لا ةهاغسدئس Lactophenol cotton blue ه ها د هنة ل وهذةرهاق لا ها عسةشها ف هل ة ههف هزلس ه س ق هس لاهه ز هلهظهر ههدلا قه ددعهسدهف ه د ة هلد هلد لاهاد ل لسق ةهود ة للا ةهند ه د ة هردئسهلد س سسه سداغ هل دش ةها د