The Volta metric and Thermodynamic Behavior of Cysteine and its Interaction with Albumin

The work involves the quantitative determination of (L – cysteine) using (SWV). L – cysteine gives a welldefined reduction peak at (-0.546) volts against[(Ag/AgCl,sat. KCl)] using phosphate buffer solution (pH = 7).The relationship between the diffusion current and concentration over the range [2 × 10(M) – 3.98 × 10(M)] is linear with a correlation coefficient of (0.9974). At higher concentrations above [ 3 × 10] molar, the reduction peak of the (L – cysteine )divided into two peaks where the original one belongs to (L – cysteine) at (-0.52 volt) and a small peak at (-0.46 volt) which may be belong to the formation of (L – cystine ) amino acid. The interaction of Albumin-Amino acid (L-cysteine) was also carried out and It was found that the reduction peak of the amino acid decreases with increasing addition amount of Albumin. The binding constant (K) is calculated at different temperatures. Vant Hoff relation was applied to obtain the thermodynamics parameters (∆H, ∆S,∆G). The interaction seems to be of the ( ion-ion) type. ـــ ــــ ـــ ــــ ــ ةمدقملأ نيتسسلا Cysteine هل زمريو ) Cys ( و وه ةـيقارلا تاناويحلا تانيتورب يف ةدوجوملاو نيرشعلا ةينيملاا ضامحلاا دحا او عون نم نوكت يتل ) L ( ) يفجنلا ، للاط 1987 ( يتلا ةيساسلاا ةدحولا نلاثمي افلسلا عيماجم عم نيتسسلاو تاـميزنلاا نـم رـيثك يف ةزفحم لماوعك ةيمها امهلو نيتوربلل ةيبيكرتلاو ةيفيظولا صئاصخلا يف مهاست ةـمظنملا تاـنيتوربلاو ةدعاسملا لماوعلاو ) Alfafara et al., 1992 ; Wen et al., 2004 ( رـبتعي اـمك ضم ةدام نيتسسلا ةـيلخلا لخاد ممستلل ةدا ) Aranda and del Olmo, 2004 ; et al., 2005 MendozaCozat ( و جتان نيتسسلا لزع نكمملا نم ً ا دوجول ةجيتنو تانيتوربلا ضعب ةجرده نع ) S ( م ملا ن نا نكم تئيزج طبترت ا نيتوربلل ةيلاع ةيرارقتسا يطعت يتلا تيربكلا روسج ً انوكم نياتسسلا ىلا لوحتيو هنم ن نـم للاخ ةيرارقتسا لا يثلاثلا لكش ل نيتوربل (Zapardid A. et al., 1995) ةـينيملاا ضاـمحلاا نم نيتسسلاو مهملا ـ نتايح يف ة ـ ا فصوب ـ ه كملا ـ سيئرلا نو ـ يتوربلل ي ـ لوملاو ن ـ شلل د ــ يتياركو رع ـ لجلا ن ــ د ينيملاا ضماحلا طبارتل ةيكيمنيادومرثلا صاوخلا ةسارد 63 ) et al., 1994 , .( Apps. D. K., ةـيتيربكلا رـصاولال لولاا لـماحلا وـه نيموـبللاا نا ظحوـل ) Homocysteine ( ذإ طبارت نإ ) Cys ( عم ) Homocysteine ( يـعيبطلا لكشـلا يف ريغت ىلا يدؤي فوس هتفيظو ريغت كلذكو نيتوربلل ) 2002 Alana, K. Majors et al., ( دقلو تراشأ نأـب ةثيدحلا تاساردلا ةمظنم ةيلمعلا نوكتو نيتسسلل يويحلا قيلختلا لا يدوي افلسلا كلاهتسا ذا ادج تحا للاخ دادزت ةـيلخلا جاـي نوياثاتولكلا ينيملاا ضماحلل لا ىلا هضرعت دنع ةصاخو تازلف ملاو ةليقثلا يف ةماسلا داو رئامخلا و تاتابنلا ) Aranda and del Olmo 2004 ; Mendoza-Cozatl. et al., 2005 ( نيتسسلل ةريبكلا ةدئافلا نم مغرلابو لخاد يعيبطلا دحلا نع داز اذا نكلو داهجلاا تلااخ يفو ممستلا ةلازاو ةيضيلاا تايلمعلا يف ببسـي ةيلخلا ممست اهل ) Kumar et al., 2006 .( و ت نمو نيتسسلأ ريدقتل ةديدع قرط دجو اه : علا ءادلاا يذ يفارغوتامورك لئاسلا سوكعلا روطلا ةينقت مادختسا يلا ) HPLC ( لدـعم دـيدحتو ساـيقل ءاشتحاب نيباصملاو ةيردصلا ةحبذلاب نيباصملا بلقلا ىضرم مد لصم يف نيتسسلا ضماح و نيتسسوموهلا عافتراب نيباصملاو بلقلا ةلضع مدلا طغض ) Kumar et al., 2002 ( . مدختسا ت عازتنلاا يرتماتلوف ةينقت يدوثاكلا ) Cathodic stripping rot. ( ساحنلا تانويا دوجوب رحبلا ءام يف نيتسسلا ريدقتل ) II ( طـسو يف ةيضماحلا هتلاد ) 8.5 ( دهج دنع ةيدوثاكلا ةجوملا مادختساب كلذو ) -0.55 ( تـلوف ) 1988 et al., Van den Berg ( ةينقت مادختساب ةينلاديصلا تارضحتسملا يف نيتسسلا نم ةيمارغوركيام تايمك ريدقت نكما دقلو لا تلبوكلا لعافت نم جتني دقعم نيوكت ىلع دامتعلااب ينايرجلا نقحلاب ليلحت ) II ( دـنع ساـقيو نيتسسلا عم ) 360 ( رتيمونان ) 1998 et al., Icardo ( . ـلا ريدقت متو ) Cys ( ديدحلا نويا ةطساوب هتدسكا دعب ً ايفيط ) III ( نيزوريفلا دوجوب ) Ferrozine ( دنع صاصتما ىصقا هل نولم دقعم نوكتي ذا ) 562 ( نـكما دـقلو رتيمونان نيب ام حوارتت ةليئض تايمك ريدقت ) 0.02 و 6 ( ـلا نم نويلملاب ءزج ) Cys ( ريدـقتل ةـقيرطلا تـقبطو ) Cys ( ةيبطلا تارضحتسملا يف ) 1998 ., Eid .M. A ( ريدـقت مـت امك نيتسـسلا نيـنيملاأ نيضـماحلا ) cysteine ( نياتسسلاو ) cystine ( تينزاك مويدوصلا يف ) Sodium Caseinate ( ةطـساوب ً اـيفاركورلاوب رطاقتملا قبئزلا بطق ) DME ( نيتسسلا ينيملاا ضماحلاريدقت مت كلذكو ) cysteine ( تينقتب ي ينايرجلا نقحلا يرتماتلوفلاو يئاـنثلا ساـحنلا نوـيا دوـجوب يجاجزلا نوبراكلا بطق مادختساب ) Copper II ( ) 2002 Zekerya Dursun, ( ساردب ءاملعلا ضعب ماق امك تا يد اهجمو ةيرتماتلوف ة نيتسـسلا يـنيملاا ضماـحلل ) cysteine ( نينايسولاثف تلبوك يئانث ىلإ روحملا نوبراكلا بطق مادختساب ) Cobalt (II) phthalocyanine ( ) Khaloo et al., 2002 ( نيتسسلا ينيملاا ضماحلأ ريدقت مت امك ) L-cysteine ( بـطق ةطساوب آيرتماتلوف لصوملا ساملا et al., 2001 ) Nicolae Spataru ( . دعس ردب لداع ءارهز و ناميلس قيفوت اللها 64 اذه نمضتيو ةـيرتماتلوفلا صاوخلا ةسارد ثحبلا نيتسـسلا يـنيملاا ضماـحلل ) L-cysteine ( ماتلوف مادختسا ةعبرملا ةجوملا ماركو (SWV) نم آدج ةليلق تايمك ريدقتل ةقيرطلا قيبطتو ينيملاا ضماحلأ نيتسسلا ) L-cysteine ( نع لآضف طبارت ةسارد ه عم نيموبللاا . يلمعلا ءزجلا 1 يئايميكلا داوملا ة ةمدختسملا ةكرش نم ةزهجم يهو ةواقنلا نم ةيلاع ةجرد ىلع ةمدختسملا داوملا عيمج نإ ) Fluka ( يرسيوسلا ة نيموبللأا يرقبلا 1Bovine Albumin ريضحت مت ] 5 10 × 1 [ نزوب كلذو نيموبللاا نم يرلاوم ) 0.0066 ( لاا نـم مغ ل يرـقبلا نيموـب ىلإ مجحلا لامكإو رطقملا ءاملاب هتباذإو ) 10 ( عس ةيمجح ةنينق يف لم اهت ) 10 ( ً ايموي هريضحت متيو لم . نيتسسلا ينيملاا ضماحلا Cysteine 2 ريضحت مت ] 3 10 [ نزوب كلذو نيتسسلا نم يرلاوم ) 0.0121 ( ءاـملا يف هتباذإو نيتسسلا نم مغ ىلإ مجحلا لامكإ مث رطقملا ) 100 ( دختساب كلذو لم اهتعس ةيمجح ةنينق ما ) 100 ( لم . 3Phosphate buffer (ph = 7) مظنملا لولحملا : هريضحت مت جزمب ) 30.5 ( لولحم نم لم ) K2HPO4 ( زيكرت يذ ] 0.2 [ عم يرلاوم ) 19.5 ( نـم لـم لولحم ) KH2PO4 ( زيكرت يذ ] 0.2 [ ىلإ مجحلا لمكأ مث يرلاوم ) 100 ( . ( D. D. Perrinc, 1974) 2 ةمدختسملا ةزهجلأا زاهج مادختساب تاسايقلا تمت لا ليلحت EG&G PARC Model 384B Polarographic Analyser equipped with unit SMDE 303A and diyital plotter DMPO4-44. 3 لمعلأ ةقيرط ت سايقلا ةقيرط ةينقت عابتإب مت ) SWV ( زاهجلا يف يتلآاكو : 1 ةفاضإ ) 5 ( لولحم نم رتيليلم ) 0.2 ( يرلاوم مـقر دـنع دعاسم تيلورتكلاك مظنم تافسوف لولحم نم ينيجورديه ) pH =7 ( سايقلا ةيلخ يف . 2 ةدمل نيجورتنلا زاغ رارمإ ) 240 ( ةيناث يف يتافسوفلا لولحملا . 3 سانملا دهجلا طيلست متي مث ب ت لثمت يتلا ةجيتنلا مسر ماركوماتلوفلا عجرملل ) blank .( 4 ينيملاا ضماحلا لولحم نم ةبقاعتم تايمك ةفاضا متي ) L-cysteine ( زيكرتب [10] ةيلخ ىلا يرلاوم سايقلا . مت ت مادختساب ةيلولاأ تاسايقلا ةيلولاا فورظلا زاهجلا يف ةتبثملا لودجلأ يف ةحضوملاو ) 1 ( ينيملاا ضماحلا طبارتل ةيكيمنيادومرثلا صاوخلا ةسارد 65 لودجلا 1 : لأا فورظلا حضوي ةيلو سايقل ينيملاا ضماحلا ) L-cysteine ( . 4 ماحلا نيب طبارتلا ريدقت ينيملاا ض ) L-cysteine ( مادختـساب ةـفلتخم ةيرارح تاجرد دنع نيموبللأاو ةينقت ) SWV ( مارغوماتلوف ليجست مت ةعبرملا ةجوملا ) SWV ( لولحمل [10] نم يرلاوم ماحلا ـ نيملاا ض ـ ي ) L-cysteine ( ينيجورديهلا مقرلا دنع ) pH=7 ( كلذ دعبو ت فاض نم ةبقاعتم تايمك نيموبللاا زيكرتب [10] ،يرلاوم مت دقو راشتنلاا رايت يف ضافخنلاا عبتت ) Ip ( دوجوب نيتسسلل و نيموبللأا ) Ip° ( رايت لثمي راشتنلاا ينيملاا ضماحلا ) L-cysteine ( نيموبللأا ةفاضإ لبق هدحول ةقلاعلا مسربو ) (Ip/Ip° دض زيكرت ضملا نيموبللاأ ـ باث باسحل فا ـ طبارتلا ت ) K ( فن داعتو ـ برجتلا س ـ يف ة رد ج ـ فلتخم ةيرارح تا ـ ة ) 293,303,310,315 ( طابترلاا تباث متراغول نيب ةقلاعلا مسر مت اهنمو ) Log K ( جرد بولقم دض ـ ة ةيكيمنيادومرثلا ميقلا باسح ضرغل ةقلطملا ةرارحلا ) ∆H , ∆G , ∆S . ( ةشقانملاو جئاتنلأ ينيملاا ضماحلل ةعبرملا ةجوملا مارغوماتلوف لجس ) L-cysteine ( يكرتب ز [9.9×10] يف يرلاوم يجوديهلا مقرلا يذ مظنملا يتافسوفلا لولحملا ين pH=7 طحلايو سايقلل ىلثملا فورظلا مادختساب لكشلا يف ةعبرملا ةجوملا مارغوماتلوف ) 1 ( دهج دنع لازتخا ةجوم رهظي اذا ) -0.546 ( تلوف . Values Optimum Condition (30)sec (0)sec (5)sec (2)mV (100)Hz (0.02) mV Deposition Time Conditioning Time Equilibration Time Scan Increment Frequency Pulse height دعس ردب لداع ءارهز و ناميلس قيفوت اللها 66 لكش 1 : ا مارغوماتلوف ينيملاا ضماحلل ةعبرملا ةجومل ) L-cysteine ( زيكرتب [9.9×10] يرلاوم ينيجورديه مقر دنع يتافسوفلا لولحملا يف ) 7 pH= ( . ضماــ ـحلل ةــ ـعبرملا ةـ ـجوملا مارغوماــ ـتلوف ساــ ـيقل ىـ ـلثملا فورــ ـظلا دـ ـيدحت ينيملاا ) L-cysteine ( لجس ت ةعبرملا ةجوملا تامارغوماتلوف ) SWV ( مل هزيكرت لولح [9.9×10] ضماـحلا نم يرلاوم ينيملاا ) L-cysteine ( يف ) 5 ( ليلم ي جرديهلا مقرلا يذ مظنملا يتافسوفلا لولحملا نمرت ني ي ) pH=7 ( ب و هفـص ادعاسم اتيلورتكلا رييغتب ةيلولاا فورظلا و بثملا ة زاهجلا يف دارفنإ ىلع لآك لودـجلا يـف ةحضوملاو ) 2 ( يئادتبا دهج دنعو ) -0.3 ( يئاهن دهجو تلوف ) -0.65 ( تلوف . -0.3 -0.5 -0.7 -0.9 1.1 Ip (nA)