Nova classe de inibidor de serinopeptidase presente na peçonha do escorpião Tityus obscurus

XX PREFÁCIO XXI 1.1. INTRODUÇÃO 25 1.1.1. ENZIMAS 25 1.1.1.1. Determinação das Constantes de Afinidade 26 1.1.1.2. Peptidases 30 1.1.2. INIBIDORES DE PEPTIDASES 32 1.1.2.1. Tipos de Inibição Enzimática 35 1.1.2.2. Inibidores de Peptidase de Venenos e Peçonhas Animais 38 1.1.2.3. Câncer, Peptidases e Inibidores de Peptidases 41 1.1.2.4. Inibidores de Peptidase com Ação em Canais de Potássio 46 1.1.3. ESCORPIÃO TITYUS OBSCURUS E ESTUDOS COM SUA PEÇONHA 53 1.2. OBJETIVOS 58 1.2.1. OBJETIVO GERAL 58 1.2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 58 1.3. MATERIAL 59 1.3.1. SOLVENTES PARA CROMATOGRAFIA LÍQUIDA (HPLC E UFLC) 59 1.3.2. COLUNAS CROMATOGRÁFICAS 59 1.3.3. ESPECTROMETRIA DE MASSA (MALDI TOF/TOF MS) 59 1.3.4. SÍNTESE QUÍMICA AUTOMÁTICA 60 1.3.5. SOLUÇÃO PARA FORMAÇÃO DAS PONTES DISSULFETO 61 1.3.6. ENZIMAS E SUBSTRATOS 61 1.3.7. MEIOS E SOLUÇÕES PARA ENSAIO DE VIABILIDADE CELULAR 63 1.3.8. SOLUÇÕES PARA ENSAIOS ELETROFISIOLÓGICOS 63 1.4. MÉTODOS 64 1.4.1. DESENHO EXPERIMENTAL 64 1.4.2. LICENÇAS, ANIMAIS E OBTENÇÃO DA PEÇONHA 65 1.4.3. FRACIONAMENTO DA PEÇONHA E PURIFICAÇÃO DO PEPTÍDEO TOPI1 65 1.4.4. ESPECTROMETRIA DE MASSA 66 1.4.5. DETERMINAÇÃO DA SEQUÊNCIA PRIMÁRIA E BUSCA POR SIMILARIDADE 67 1.4.6. SÍNTESE QUÍMICA EM FASE SÓLIDA E FORMAÇÃO DAS PONTES DISSULFETO 68 1.4.6.1. Purificação do Peptídeo Sintético 70