Efecto del sulodexide en la permeabilidad vascular renal en ratas diabéticas

The objective of this research was to determine the effect of prolonged administration of glycosaminoglycan sulodexide (SDX) on renal vascular permeability in diabetic rats with the method of Evans blue (EA). Type 1 diabetes, was induced to Sprague-Dawley rats by administering i.v. Streptozotocin (STZ). The animals were divided into three groups (C = control, STZ-SS and STZ-SDX = pre-treated with SDX 15 mg/Kg s.c). Each experimental group consisted of 10 rats and they were treated for 90 days with sulodexide (STZSDX) or the corresponding volume of saline solution (STZ-SS). At 45 and 95 days of starting treatment, renal function and blood pressure were determined. After three months, the method of EA was applied to five rats of each group, the remaining were sacrificed, and their kidneys extracted for histopathological study. The results of renal function and blood pressure were higher in the STZ-SS group compared to the STZ-SDX group and vascular permeability was lower in the STZ-SDX group (9.73 ± 1, 30 μg AE/g tissue) as opposed to the value obtained in the STZ-SS group (15,55 ± 2, 15 μg AE/g of tissue, p<0.01 vs. control). These results demonstrate that administration of sulodexide improves renal function and protects the kidney from the morphological changes of diabetic nephropathy, since it decreases the loss of the integrity of the glycocalix associated with the increased permeability of the glomerular endothelium, which is related to the results obtained from the histopathological study. Recibido: 27-07-2017 Aceptado: 07-06-2018 218 González-Serryn y col. Investigación Clínica 59(3): 2018 rulo dependiente de la carga iónica para la albúmina y otras moléculas proteicas, está a cargo de esta capa compuesta por glicoproteínas y proteoglicanos como el heparán sulfato, de carga negativa, que le confiere las características de negatividad al endotelio, de manera que el endotelio glomerular contribuye significativamente a formar la barrera a macromoléculas (6,7). La disfunción renal a mediano o largo plazo conduce al desarrollo de insuficiencia renal crónica en un porcentaje elevado de los pacientes diabéticos tanto tipo 1 como tipo 2 y actualmente constituye la primera causa de insuficiencia renal crónica (IRC) en los Estados Unidos y en la mayoría de los países occidentales (8). La disfunción endotelial asociada a la diabetes no se limita al glomérulo renal (nefropatía diabética), por lo tanto, los pacientes diabéticos presentan un alto riesgo de sufrir complicaciones cardiovasculares como cardiopatía isquémica, accidente cerebrovascular y enfermedad vascular periférica. En estos pacientes las estrategias terapéuticas se centran en el uso de agentes que minimicen los factores de riesgo como hipertensión o dislipidemia y que podrían tener un efecto protector sobre el endotelio (9,10). Recientemente, los esfuerzos por desarrollar terapias alternativas que permitan prevenir la disfunción endotelial han resultado en la incorporación de glicosaminoglicanos como el sulodexide, el cual está compuesto por una mezcla de 80% de heparina y 20% de heparán sulfato y al que se le atribuye actividad antitrombótica, profibrinolítica y antiinflamatoria, y es considerado como un agente regulador del balance lipoproteico (11-14). Los hallazgos obtenidos en modelos experimentales de disfunción endotelial, han demostrado el efecto favorable del sulodexide, al disminuir de una manera significativa el número de células endoteliales descamadas en modelos de disfunción endotelial, por lo que es considerado un agente protector del endotelio, con un posible efecto preventivo del aumento de la permeabilidad endotelial asociada a la diabetes (15). Por otra parte, a nivel renal el sulodexide previene los cambios morfológicos del glomérulo que se presentan como consecuencia del desarrollo de la diabetes (16-19). Sin embargo, en dos grandes ensayos aleatorios doble ciego, controlados con placebo, que involucraron sujetos diabéticos con micro y macroalbuminuria, el sulodexide no logró reducir la excreción de albúmina en orina, lo cual pone en duda el efecto renoprotector de dicho glicosaminoglicano (20,21). Debido a lo antes expuesto, hoy en día sigue siendo considerado controversial el posible efecto renoprotector del sulodexide en pacientes diabéticos, por lo que se hace imprescindible ampliar el análisis de la extravasación de proteínas. La cuantificación de la extravasación de proteínas plasmáticas mediante la determinación de los valores de proteinuria y microalbuminuria, ha permitido evaluar la disfunción endotelial asociada a alteraciones en la permeabilidad vascular a nivel glomerular. Este tipo de pruebas en modelos animales pueden ser influenciadas por varios factores que afectan la permeabilidad de la barrera endotelial, entre los que se incluyen la edad y el peso del animal, condiciones ambientales como la temperatura, la humedad, y muy importante el estrés de manipulación de los animales de experimentación. Considerando lo anteriormente descrito, se escogió el método de azul de Evans para cuantificar la extravasación de proteínas plasmáticas de forma directa. El método de azul de Evans ha permitido evaluar este parámetro gracias a la propiedad del colorante de unirse cuantitativamente a la albúmina, tanto in vitro como in vivo. Esta propiedad ha sido ampliamente usada para cuantificar la extravasación proteica como un índice del incremento de la permeabilidad vascular e indirectamente del daño tisular (22). Gracias a esta característica fue el método seleccionado en este trabajo de investigación para determinar posibles cambios en la permeabilidad endotelial en el riñón en un modelo de diabetes tipo I (DMI), luego del tratamiento con el sulodexide y Sulodexide en la permeabilidad vascular renal en ratas diabéticas 219 Vol. 59(3): 216 229, 2018 contribuir de este modo con el estudio de los posibles efectos terapéuticos de este tipo de glicosaminoglicanos en la nefropatía diabética. MATERIALES Y MÉTODOS