Estudio de los caracteres epidemiológicos de Streptococcus uberis en explotaciones de vacuno lechero en Cantabria aplicando técnicas de tipificación molecular

El objetivo del presente trabajo fue la caracterizacion de cepas de Streptococcus uberis y la aplicacion de tecnicas de tipificacion molecular para llevar a cabo su estudio epidemiologico. Con estos fines, se muestrearon 233 vacas de 4 explotaciones de vacuno lechero en Cantabria, se analizaron 3086 muestras de leche y 194 muestras medioambientales, para el estudio de los caracteres epidemiologicos de Srep. uberis. Para ello se emplearon tecnicas de identificacion a nivel de especie (definiendo un protocolo sencillo de identificacion basado en un reducido numero de pruebas bioquimicas mas confirmacion especifica por PCR), tecnicas de tipificacion molecular (PFGE y GTG5-PCR), test de susceptibilidad antibiotica y deteccion de factores de virulencia mediante PCR. Se confirmo el aislamiento de 551 cepas de Strep. uberis a partir de las distintas muestras analizadas, seleccionando con posterioridad cepas de distintas procedencias para llevar a cabo su tipificacion. Se observo, tras la aplicacion de metodos de identificacion a nivel de especie al estudio de dinamica de infeccion, la dificultad de conseguir la erradicacion de Strep. uberis durante el secado, traduciendose en una tasa de curacion del 66% tras el tratamiento antibiotico, asi como la existencia de diferencias importantes entre explotaciones, asociadas principalmente al manejo y no tanto a la terapia antibiotica empleada. Los principales reservorios de Strep. uberis fueron las zonas de pasillos, constituidas fundamentalmente por estiercol, tanto en el area de las vacas secas como en lactacion, los potreros de las vacas en lactacion, y el material de cama, tanto de las vacas secas como en lactacion. La aplicacion de tecnicas de tipificacion molecular al estudio de la dinamica de infeccion, presenta las infecciones producidas por Strep. uberis como procesos de curacion-reinfeccion, en los que se suceden distintas cepas de este microorganismo; ademas ratifica su caracter fundamentalmente medioambiental, debido a la elevada heterogeneidad de las cepas aisladas de los procesos infecciosos, en los que las cepas predominantes en ubre tambien lo fueron en el medioambiente. Ni los patrones de sensibilidad/resistencia a antibioticos ni los perfiles de genes de virulencia de las cepas varian en funcion de su origen. Las dos tecnicas de tipificacion molecular empleadas (PFGE y GTG5-PCR) son validas a la hora de enfrentar el estudio epidemiologico de Strep. uberis, alcanzandose interpretaciones similares con ambas tecnicas, y las dos permiten diferenciar las cepas segun su origen; sin embargo PFGE resulta mas discriminatoria, aunque la tipificacion con la tecnica GTG5-PCR es mas sencilla de llevar a cabo