PRIMA1 ile lösemi hücrelerinde Bruton tirozin kinaz inhibisyonu aracılığı apoptoz uyarımı

Amac: Bruton’s tirozin kinaz (Btk) ,  B lenfositlerinin gelisimi, proliferasyonu ve B hucre serilerinin farklilasmasinda, B hucre reseptoru (BCR) aracili sinyal iletiminde kritik rol oynadigi bilinmektedir. Bu calismada PRIMA-1’in Btk aktivitesi uzerindeki antitumor etkisi ve altta yatan apopitoz mekanizmasi arastirilmistir. Gerec ve Yontem: KBM3 ve Namalwa hucrelerinde Btk ekpresyon seviyesi uzerine PRIMA 1’in etkisini kontrol etmek icin kantitatif real time PCR ve Western Blot analizi yapilmistir. FACS ve flouresan mikroskobi kullanilarak apoptozda Btk ‘nin rolunu belirlemek icin, wild tip Btk ve Btk-NLS ( Nukleus hedefli Btk) ekpresyon plazmidleri COS-7 hucrelerine transfekte edildi. Bulgular: Bu calismada, akut myelomonositik losemi hucrelerine anti losemik ilac uygulanmasi sonucunda, Btk ekspresyonun mRNA ve protein seviyesinde baskilanmasini gozlemledik. Boylece Nrf2 ve HO-1 proteinlerinin ekpresyonlarinda bir azalma oldugunu da farkettik. Dikkat cekici bir sekilde Btk nukleer lokalizasyonu, dusuk dozda PRIMA-1 uygulamasi ile artiyorken, yuksek dozda PRIMA -1 uygulamasi ile Btk ekspresyonu baskilaniyor. Buna ek olarak, wild tip Btk ile kiyaslandiginda,  nukleer hedefli asiri ekspresyonda, apoptozisde azalma ve hucre canlilik oraninda artis ile sonuclaniyor. Sonuc: Bulgularimiza gore, PRIMA-1 uygulamasi ile Nrf2 ve HO-1 oksidatif cevap araciligi ile nukleer Btk, hucre apoptozunu azalmaktadir.