Evaluación de dos métodos para extracción de ARN en saliva en niños

Objetivo: Estandarizar un protocolo de extraccion de ARN en muestras de saliva de ninos. Material y metodos: A partir de muestras de saliva provenientes de 60 ninos que participaron previa autorizacion de sus padres. Se compararon dos metodos para extraccion de ARN, evaluando concentracion, calidad y rendimiento; ademas se realizo la expresion genica del gen GUSB a traves de la tecnica RT-PCR (transcriptasa reversa-reaccion en cadena de la polimerasa). Los datos fueron analizados mediante medidas de tendencia central y dispersion, frecuencias y porcentajes, para establecer diferencias se utilizaron las pruebas t-Student y χ2 (p <0.05). Resultados: Al analizar la cantidad de celulas por mL de saliva se encontro una media de 564,977.8 (DE = 246,678.6); se logro estandarizar un metodo de extraccion de ARN en saliva de ninos, especifi camente el que utilizo RNeasy® Protect Saliva Mini Kit- Qiagen mostro mejores caracteristicas de concentracion de ARN (p = 0.0000) y rendimiento (p = 0.0000) al compararlo con el que uso QIAzol®; no existieron diferencias en la calidad del ARN (p = 0.146). Conclusion: El ARN pudo extraerse de muestras salivales de ninos, por lo cual se sugiere el uso de la saliva para analisis molecular de diferentes enfermedades sistemicas y de la cavidad bucal.