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En esta Tesis Doctoral se ha abordado el estudio de la respuesta al frio en el flavedo de frutos citricos. Los frutos citricos deben someterse a bajas temperaturas durante los tratamientos cuarentenarios requeridos para evitar la propagacion de plagas con la exportacion. Desafortunadamente, los frutos de variedades sensibles desarrollan sintomas de dano por frio durante este tratamiento, fundamentalmente en el flavedo (parte externa coloreada de la piel). En este trabajo se utilizaron frutos de Clementina de Nules (CN), variedad tolerante, y de Clementina Fortune (F), sensible, para analizar a nivel transcriptomico las respuestas de adaptacion y de desarrollo de danos durante la exposicion al frio. Para ello (1) se generaron dos genotecas de cDNA (una de longitud completa) representativas de flavedo de frutos CN sometidos a estres por frio; (2) los cDNAs novedosos obtenidos se incluyeron junto con otros para generar la micromatriz del Proyecto de Genomica de Citricos (CFGP1) para el analisis transcriptomico; y (3) utilizando esa micromatriz, se analizaron los cambios que ocurren en el transcriptoma de los flavedos de CN y F a lo largo de una serie temporal de almacenamiento a 2oC. Las genotecas de frio mostraron un considerable porcentaje de novedad, entre el que se identificaron genes potencialmente especificos de la respuesta a las bajas temperaturas. La micromatiz CFGP1 contiene cDNAs de 12672 ESTs, correspondientes a 6875 unigenes, de los cuales 10.3% ESTs proceden de las genotecas de frio. El analisis transcriptomico puso de manifiesto que la tendencia general de la respuesta frente a la exposicion al frio fue similar en CN y en F durante las cuatro primeras semanas de exposicion. En ambas variedades se produjo una represion de procesos biosinteticos, principalmente de proteinas y tambien de lipidos, y se activo su catabolismo. Sin embargo, tambien se indujo la expresion de otro grupo de genes relacionados con la sintesis de proteinas, lo que sugiere un reajuste en las funciones celulares a nivel de la traduccion. Pese a la similitud, en CN se observaron cambios mas intensos durante la primera semana que luego cesaron, mientras que en F los cambios fueron mas progresivos. La comparacion transcripcional si revelo diferencias notables entre los flavedos de CN y F previamente a su exposicion al frio. Algunas de estas diferencias podrian ser causantes, al menos en parte, de la tolerancia de CN, al igual que el citado retraso de la respuesta al frio en F. Por ultimo, tambien se detecto un programa de expresion tardio exclusivo de F, que podria relacionarse con el desarrollo de danos.

Respuesta de los frutos cítricos a las bajas temperaturas: estudio mediante micromatrices