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La mesure de la teneur en hemoglobine dans les milieux biologiques releve de plusieurs techniques. L’objectif de ce travail etait de determiner la teneur en hemoglobine des urines lors d’une hemolyse intra vasculaire par un reactif au 3,3’-dimethylbenzidine. A partir d’une solution d’hemoglobine humaine dont la concentration a ete determinee par le reactif de Drabkin, une methode en point final utilisant le 3,3’- dimethylbenzidine comme chromogene en presence de H2O2 a ete evaluee par sa sensibilite, sa repetabilite, sa reproductibilite et l’interference de la bilirubine. Elle a ensuite ete utilisee pour doser l’hemoglobine dans les urines de 56 malades presentant une hemolyse intra vasculaire aigue. La linearite de la methode etait bonne entre 0,06 et 1 g/L d’hemoglobine ; sa limite inferieure de detection etait de 3 mg/L d’hemoglobine ; la bilirubine n’interferait pas sur la methode a la concentration de 100 mg/L. La repetabilite (coefficient de variation intra essai = 3,12%, 2,36% et 1,27% respectivement pour des solutions d’hemoglobine de concentration 0,25, 0,5 et 1 g/L) et la reproductibilite (coefficient de variation inter essai = 4,15%, 3,12% et 1,67% respectivement pour des solutions d’hemoglobine de concentration 0,25, 0,5 et 1 g/L) pour 20 essais etaient bonnes. Cette methode peut etre utilisee en pratique courante quotidienne pour le dosage de l’hemoglobine urinaire dans les laboratoires de chimie clinique.

Dosage de l’hémoglobine urinaire par un réactif au 3,3’-diméthylbenzidine : Mise au point technique