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Introduzione. I micobatteri a rapida crescita (RGM) solo occasionalmente sono causa primaria di malattia nell’uomo. Nei soggetti affetti da fibrosi cistica (FC), a causa della persistente patologia ostruttiva delle vie aeree, è maggiore il rischio di sviluppare infezioni da RGM. L’aumento di prevalenza di Mycobacterium abscessus e Mycobacterium chelonae nella popolazione con Fibrosi Cistica e la loro implicazione nella malattia cronica polmonare, ci hanno indotto ad attivare specifici programmi di sorveglianza. Scopo. L’osservazione occasionale che gli RGM crescono sul terreno selettivo generalmente utilizzato per isolare Burkholderia cepacia complex (BCSA), ci ha indotti a verificare se tale terreno possa essere utilizzato per isolare M. abscessus e M. chelonae dall’espettorato di pazienti con Fibrosi Cistica. Pazienti e Metodi. Nel periodo 01/03/2005-31/03/2006), è stato effettuato l’esame colturale di 1500 campioni di espettorato provenienti da 500 pazienti FC secondo procedure standard. Le piastre di BCSA, seminate, dopo fluidificazione, con 100 μl di campione, sono state incubate aerobicamente a 37°C per 72 ore e successivamente incubate a temperatura ambiente per altri 10 gg. Su ogni nuovo lotto di terreno è stato eseguito il CQI, mediante utilizzo di 2 ceppi ATCC: M. abscessus ATCC 23004 and M.chelonae ATCC 35752. Tutte le colonie suggestive per RGM sono state riseminate su agar sangue e identificate a livello di specie, usando una PCR specie-specifica per i Micobatteri (GenoType Mycobacterium CM; Hain, Nehren, Germany, distribuito dalla Ditta Arnika). Il test è basato su una ibridizzazione inversa, atta a rilevare un prodotto di amplificazione di un frammento di circa 230 pb all’interno del gene 23 S rRNA. Risultati. Dopo 13 + 3 gg di incubazione compaiono piccole colonie, non pigmentate, lisce e/o rugose, dal tipico odore di “cantina”. Tutti i 50 ceppi sospetti per RGM, isolati dall’espettorato di 27 pazienti FC (5.4%), furono geneticamente confermati dal test GenoType Mycobacterium CM. 19 pazienti erano colonizzati con M. abscessus e 7 con M. chelonae. Conclusioni. L’osservazione che gli RGM crescono sul terreno selettivo per B. cepacia complex, ci permette di ricercarli in tutti i campioni con un metodo estremamente semplice e poco costoso. E’ comunque auspicabile effettuare un test di biologia molecolare per identificare gli RGM a livello di specie. 023

METODO COLTURALE PER L’ISOLAMENTO DI MYCOBACTERIUM ABSCESSUS E MYCOBACTERIUM CHELONAE DALL’ ESPETTORATO DI PAZIENTI CON FIBROSI CISTICA