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Microbiologia Medica 157 catena epidemiologica di diffusione, per approntare misure di contenimento nei reparti ad alto rischio (ematologie, oncologie, emodialisi e trapianti), e di profilassi e terapia nei pazienti esposti. A questi requisiti rispondono piattaforme molecolari multiple e rapide, per l’identificazione differenziale di agenti virali mentre le tecniche di sequenziamento associate a studi di filogenesi consentono la tipizzazione degli isolati e la definizione della catena epidemiologica di trasmissione. Scopo. Allestimento di un sistema multiplo di real-time-PCRTaqMan per l’identificazione e tipizzazione dei virus dell’influenza A (FluA) e B (FluB) nell’ambito del controllo nosocomiale dell’influenza nei reparti di oncoematologia. Materiali e metodi. Durante le stagioni 2004-2005 e 2005-2006 sono stati analizzati 82 materiali provenienti dalle vie respiratorie superiori di 64 pazienti in attesa di trapianto allogenico di cellule staminali. I risultati in real-time-PCR sono stati confrontati con quelli in PCR convenzionale. I campioni positivi sono stati sequenziati sul gene HA per stabilire la presenza di un cluster epidemico. Risultati. Mediante real-time-PCR sono stati identificati 18 campioni positivi per FluA (22%) e 4 per FluB (5%), 12 in più di quelli identificati con le tecniche di PCR tradizionali. 14 FluA appartenevano al sottotipo H3N2, 2 a H1N1, e 2 non erano tipizzabili. In accordo con i dati stagionali, nel 2004-2005 sono risultati positivi 13/30 (43%) campioni di cui 11 FluA e 2 FluB, mentre nel 2005-2006 solo 9/52 (17,3%: 7 FluA e 2 FluB). L’analisi della sequenza del gene HA dei campioni positivi in entrambe le stagioni, suggerisce la presenza di un unico cluster caratterizzato da una distanza filogenetica inferiore al 1,2%. In entrambe le stagioni è stata effettuata una profilassi specifica dei contatti con amantadina mentre e nei pazienti sintomatici è stato utilizzato un breve ciclo di terapia con inbitori della neuraminidasi virale, che ha risolto l’infezione senza complicazioni. Conclusione. La piattaforma di real-time-PCR associata all’analisi di sequenza degli isolati influenzali, è risultato strumento accurato, rapido, sensibile e specifico fornendo informazioni importanti nell’ambito della sorveglianza della diffusione dell’influenza nei reparti ad alto rischio, consentendo di attuare una corretta e pronta strategia di profilassi e terapia dei pazienti. S7.4

IL RUOLO DELLA BIOLOGIA MOLECOLARE NEL CONTROLLO DELLE INFEZIONI BATTERICHE NOSOCOMIALI E NELLA CARATTERIZZAZIONE DELLE RESISTENZE AGLI ANTIBIOTICI